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實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

（一）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。

（二）儀器設(shè)備：1. 分光光度計(jì),；2. 電子ding載天平（感量0.01g）,；3. 研缽；4. 棕色容量瓶,；5. 小漏斗,；6. 定量濾紙；7. 吸水紙,；8. 擦境紙,；9. 滴管。

（三）試劑：96%乙醇（或80%丙酮）,；石英砂,；碳酸鈣粉。

 

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料,，擦凈組織表面污物,，剪碎（去掉中脈），混勻,。2. 稱取剪碎的新鮮樣品0.2g,，共3份，分別放入研缽中,，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95%乙醇,，研成均漿，再加乙醇10ml,，繼續(xù)研磨至組織變白,。靜置3～5min。3. 取濾紙1張,，置漏斗中,，用乙醇濕潤(rùn)，沿玻棒把提取液倒入漏斗中,，過濾到25ml棕色容量瓶中,，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次,，后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?. 用滴管吸取乙醇,，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o綠色為止,。后用乙醇定容至25ml,，搖勻。5. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95%乙醇為空白,，在波長(zhǎng)665nm,、649nm下測(cè)定吸光度。

四,、實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算：將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.9665－6.88A649,；Cb=24.96A649－7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度（Ca,、Cb：mg/L）,，二者之和為總?cè)~綠素的濃度。后根據(jù)下式可進(jìn)一步求出植物組織中葉綠素的含量：

葉綠素的含量（mg/g）= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重（或干重）,。