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上海源葉生物科技有限公司
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研究發(fā)現(xiàn)更多CRISPR-Cas工具
2013-11-29 閱讀(803)
CRISPR-Cas技術作為一種新的基因組編輯方法,正受到廣泛的關注,。自去年以來,,引用這一技術的文章數(shù)量在直線上升。而隨著更多CRISPR-Cas元件的發(fā)現(xiàn),,這項技術有望變得更加多功能,。目前,來自化膿性鏈球菌,、腦膜炎奈瑟菌等細菌的RNA指導的Cas9都已被開發(fā)成基因組操控的工具,。如今,據(jù)德國亥姆霍茲感染研究中心的研究人員介紹,,Cas9工具箱有望進一步擴大,,從而改善這種工具的特異性。他們的研究成果發(fā)表在11月22日的《Nucleic Acids Research》在線版上,。
研究人員在8種代表II型CRISPR-Cas的菌株中研究了雙鏈RNA:Cas9的多樣性和互換性,。因此,除了介紹更多的CRISPR-Cas元件,,研究人員還探索了CRISPR-Cas系統(tǒng)的進化,,包括協(xié)同進化以及系統(tǒng)組件的水平轉(zhuǎn)移。在研究過程中,,他們鑒定了8種Cas9直系同源酶中的雙鏈RNA和PAM(protospacer adjacent motifs),。為了評估雙鏈RNA:Cas9的多樣性,,他們開展了現(xiàn)有基因組中II型CRISPR-Cas系統(tǒng)的生物信息學分析,并鑒定出多個細菌種類中的Cas9同源物,。
作者認為,,這項工作為支持雙鏈RNA(tracrRNA:crRNA)與Cas9蛋白的協(xié)同進化提供了*實驗證據(jù)。他們還認為,,在這項研究中鑒定出的各種雙鏈RNA,、Cas9同源物以及相關的PAM序列有望增強CRISPR-Cas編輯,帶來多功能性和可能的特異性,。文章的通訊作者,、亥姆霍茲感染研究中心的Emmanuelle Charpentier博士談道,研究小組在分析和比較了多個細菌菌株的Cas9和tracrRNA:crRNA雙鏈RNA后,,認為他們能夠?qū)碓从诓煌毦腃as9蛋白分成多個小組,。在同一小組中,CRISPR-Cas系統(tǒng)可以交換,,而不同小組之間不能交換,。
談到這項研究成果的應用,研究人員認為,,這些酶可以結(jié)合起來,,從而一次實現(xiàn)目標DNA的多個改變。這有望應用于遺傳性疾病的治療,,一次糾正患者DNA中的不同突變,。此外,這種方法還可以用來對付艾滋病毒HIV,,它通過人體免疫細胞的受體來感染細胞,。利用CRISPR-Cas,受體基因可被刪除,,讓患者對病毒免疫,。盡管這些應用并非能在短期內(nèi)實現(xiàn),但亥姆霍茲感染研究中心仍然對CRISPR-Cas技術的潛力表示樂觀,。Charpentier博士談道:“我的一些同事已經(jīng)將它與PCR相比較,。”