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上海源葉生物科技有限公司
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sigma弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑說明書
2012-9-22 閱讀(664)
sigma弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑說明書
一,、定義：
弗氏佐劑（Freundadjuvant）,這是目前zui常用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的佐劑,，它是將抗原水溶液與油劑（石蠟油或植物油）等量混合，再加乳化劑（羊毛脂或葉吐溫80）制成油包水抗原乳劑,，稱之為不*弗氏佐劑,。如在不*佐劑中加入分枝桿菌（如死卡苗）則稱為*弗氏佐劑,。
二,、制備方法：
弗氏佐劑是現(xiàn)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中zui常用的佐劑，分為不*弗氏佐劑和*弗氏佐劑,。不*弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成,，組分比為1～5：1，可根據(jù)需要而定,，通常為2：1,。不*佐劑中加卡介苗（zui終濃度為2～20mg/ml）或死的結(jié)核分枝桿菌，即為*弗氏佐劑（FCA）,。一般注射時(shí)用1／2體積FCA加上1／2體積的抗原進(jìn)行乳化,，第二次或第三次注射時(shí)用不*佐劑或不用佐劑,。如不加佐劑，則抗原量增大10-20倍,。
配制方法：按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi),，用超聲波使之混勻，高壓滅菌,，置4℃下保存?zhèn)溆谩?br />
在免疫動(dòng)物前,，先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合，佐劑和抗原體積比一般為1：1,，制備成"油包水"乳狀液,。因?yàn)楹琒DS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復(fù)合物，注射入動(dòng)物體內(nèi)時(shí)一定要保持乳化狀態(tài),?？乖昧恳暱乖肿恿坎煌懊庖咴约懊庖邉?dòng)物不同而有一定差異，無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)和固定模式,。一般是每兔（約2kg重）或每羊（約20kg重）第1次注射抗原1mg,，以后逐次增加抗原量，zui多每次不超過3mg,。佐劑與抗原乳化可按如下方法進(jìn)行：
（1）研磨法：先將佐劑加熱并取適量放入無菌的玻璃研缽內(nèi),，待冷卻后再緩緩滴入等體積的抗原溶液，邊滴邊按同一方向研磨,，滴加抗原的速度要慢,。待抗原全部加入后，繼續(xù)研磨一段時(shí)間,，使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑,。本法適于制備大量的佐劑抗原，缺點(diǎn)是研缽壁上粘附大量乳劑,，抗原損失較大,。
（2）注射器混合法：將等量的弗氏佐劑和抗原溶液分別吸入兩個(gè)注射器內(nèi)，兩注射器之間以一細(xì)膠管相連,，注意排凈空氣,，然后交替推動(dòng)針管，直至形成粘稠的乳劑為止,。本法優(yōu)點(diǎn)是容易做到無菌操作,，抗原損失少，適用于制備少量的抗原乳劑,。但同時(shí)難以乳化*,，個(gè)別抗原，用塑料注射器根本推不動(dòng),，而用玻璃注射器又有滲漏,。制備好的乳化劑經(jīng)鑒定才能適用,。鑒定方法是將乳化劑滴入冷水中，若保持完整不分散,，成滴狀浮于水面,，即乳化*，為合格的油包水劑,。
（3） 超聲：實(shí)驗(yàn)室條件好點(diǎn)的,，比如說有超聲破碎儀的，一定要控制超聲頻率和時(shí)間,，超聲容易激發(fā)一些自由基,，對(duì)抗原有未知損害。乳化方法要根據(jù)抗原和需要而定,。
三,、其他免疫佐劑的物質(zhì)
弗氏佐劑也屬于免疫佐劑。其他免疫佐劑的物質(zhì)有：①微生物及其產(chǎn)物,，常用的微生物有分枝桿菌,、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌以及處左蘭氏陰性桿菌的提取物脂多糖,，自分枝桿菌的提取物質(zhì)胞壁酰二肽等,。②多聚核苷酸，如多聚肌苷酸：胞苷酸（poly1:C）,多聚腺苷酸（poly1:A：μ）等;,。③無機(jī)物,，如明礬及氫化鋁等。
佐劑的作用機(jī)制尚不*清楚：①它可能增加抗原的表面面積,，易為巨噬細(xì)胞所吞噬,；②延長抗原在體內(nèi)的存留期，增加與免疫細(xì)胞接觸的機(jī)遇,；③誘發(fā)抗原注射部位及其局部淋巴結(jié)的炎癥反應(yīng),，有利于刺激免疫細(xì)胞的增殖作用。
四,、區(qū)別：
弗氏不*佐劑
產(chǎn)品簡介：弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,，含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,，并刺激局部免疫反應(yīng),。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激,。為了減少副作用,，不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強(qiáng)免疫。
弗氏*佐劑
產(chǎn)品簡介：弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,，能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體,。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,，可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,，并刺激局部免疫反應(yīng),。
五、儲(chǔ)存：
儲(chǔ)存在低溫,，通風(fēng)的區(qū)域,。
