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上海源葉生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： S30260異硫氰酸胍,30259鹽酸胍,嗜熱菌蛋白酶 |
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感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化實驗流程
2012-7-7 閱讀(1298)
1. 取 100μl 感受態(tài)細胞于冰浴上融化,。
2. 加入 1μl 純質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物,，輕輕吹打混勻,，冰浴 30 min,。
3. 將菌液放入 42℃水浴中熱激 90 秒,，立即放入冰浴中 2 min。
4. 加入 0.9ml SOC,，于 37℃恒溫搖床上 200rpm×1hr 溫育,。
5. 將菌液 4000rpm/min 離心 3min，留 200μ l 上清將菌體打散,，均勻涂布于含適當 抗生素的瓊脂平板表面,，平板于 37℃倒置培養(yǎng)過夜。
注：
① 新倒的平板可于 37℃培養(yǎng)箱中預(yù)先放置數(shù)小時至過夜干燥,。
② 當轉(zhuǎn)化的是 TA 克隆連接產(chǎn)物時可在菌液中加入 8μl 1M IPTG 和 40μl 20mg/ml X -gal 以進行藍白斑篩選,。
