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金葡菌毒素相關(guān)基因
2011-5-7 閱讀(1060)
金葡菌的致病力強弱主要取決于三類毒力因子：產(chǎn)生的毒素,、侵襲性酶和其他結(jié)構(gòu)成分,。a.毒素：腸毒素（staphyloccoccla enterotoxin,，SE）,、,，毒性休克綜合征毒素-l（toxic shock syndrome toxin 1,，tsst-1）,、表皮剝落毒素（exfoliative toxins，eta-b）,、溶血毒素（staphylolysin）及殺白細(xì)胞素（1eukoeidin）等,。L侵襲性酶：血漿凝固酶（coagulase）、耐熱脫氧核糖核酸酶（heat stable nuclease）,、纖維蛋白溶解酶（fibrinolysin）,、透明質(zhì)酸酶（hyalurouidase）等。c．其他：黏附素,、莢膜,、胞壁肽聚糖等。由于金葡菌的致病性主要與其產(chǎn)生的各種毒素有關(guān),，因此關(guān)于各種毒素的基因檢測一直以來都是研究的熱點,。
a．腸毒素基因。腸毒素是金葡菌產(chǎn)生的一種耐熱的外毒素,，是其主要致病因素,，有報告表明近50％的金葡菌菌株在實驗室條件下能產(chǎn)生腸毒素，并且一個菌株能產(chǎn)生兩種或兩種以上的腸毒素,，現(xiàn)已鑒定出的腸毒素有A型,、B型、C1～C3型,、D型,、E型,、G型,、H型、I型,、J型11種,。一般來說，食物中毒時毒素A型,、D型常見,，B型、C型次之，涉及到E型毒素的發(fā)生率zui低,，各腸毒素毒力不一,，A型毒素毒力較強，D型較弱,。對腸毒素的檢測方法主要包括經(jīng)典的免疫學(xué)試驗,、動物試驗等，當(dāng)然也有一些其他的現(xiàn)代方法,，如向四海等通過表面等離子體技術(shù)檢測了腸毒素B,。鑒于傳統(tǒng)方法的低靈敏性、低專一性,， 目前的檢測手段已越來越趨向于分子生物學(xué)方法,，針對特異性產(chǎn)毒素基因，如傳統(tǒng)的SEA,、SEB,、SEC、SED基因及新發(fā)現(xiàn)的腸毒素基因SEI,、SEJ等進(jìn)行PCR及探針檢測,，這也是當(dāng)前分子生物學(xué)用于檢測致病性金葡菌zui常用的手段。多數(shù)產(chǎn)腸毒素的基因位于染色體上,，且一般至少有兩個基因位點,；少數(shù)由質(zhì)粒控制,，且通常與耐藥性基因處于相同質(zhì)粒中,，如SED基因位于27．6kb的質(zhì)粒PIB485上，用EB消除PIB485時,，菌株的耐甲氧西林性狀隨之消失,；SEB基因亦與青霉素抗性質(zhì)粒相關(guān)，80％的青霉素抗性菌株可產(chǎn)生SEB,。針對腸毒素不同基因的PCR檢測已有大量報道,，這里不再贅述。
b．毒性休克綜合征毒素-1（toxicshock syndrome toxinl,，tsst-1）,。由噬菌體I群金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)，可引起機體多個器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征（TSS）,。zui早發(fā)現(xiàn)于1987年,，稱為腸毒素F或熱源性外毒素（PEC），后統(tǒng)稱為TSST-1,，該毒素在美國的病死率為13％,。編碼TSST-1的基因位于染色體上，TSST-1的蛋白質(zhì)密碼序列長度為585個堿基對（194個氨基酸），據(jù)此推測其相對分子質(zhì)量為22049,。K．Becker等在對429株臨床分離金葡菌進(jìn)行的PCR-DEIA（PCR-DNA enzyme immunoassays）的檢測中,，發(fā)現(xiàn)有約20％的菌株可擴增出tsst-1基因。
c．表皮剝落毒素（exfoliative toxin,，et）,。由噬菌體Ⅱ型金葡菌產(chǎn)生的一種外毒素，分為A,、B兩型,，可引起人的葡萄球菌性燙傷樣皮膚綜合征（staphylococcus scalded skin syndrome，SSSS）,，常見于新生兒,，病死率20％。其中eta為染色體編碼,，etB基因則位于27X106u的質(zhì)粒上,。K．Becker等在對429株臨床的分離金葡菌進(jìn)行的PCR-DEIA（PCR-DNAenzymeimrnunoassays）檢測中，成功擴增出ec基因,，同時表明只有少數(shù)菌株具有產(chǎn)該毒素能力,；Y．Hayakawa等對臨床乳房炎金葡菌分離株的eta基因及其調(diào)控基因（accessorygeneregulator，agr）進(jìn)行了PCR擴增,，發(fā)現(xiàn)其與人源分離株eta基因僅在ORF上游區(qū)存在三個堿基的差異,；此外，盡管在32個位點存在差異,，人源分離株etaORF上游120bp處的ORF 0-4）也在乳源菌株中被發(fā)現(xiàn),，表現(xiàn)出了一定的保守性。
