*步,、先將培養(yǎng)操作室形成厭氧環(huán)境:
1,、按使用要求在培養(yǎng)操作室內(nèi)放置除氧催化器及已封閉的培養(yǎng)皿等。500g鈀粒除氧劑(密封狀態(tài))和500克干燥劑,。
2,、按下電源開關(guān),關(guān)緊取樣室內(nèi),、外門,,按下真空泵按鈕將取樣室抽成負(fù)壓(見真空表指針指向
0.06MPa)。
3,、要將培養(yǎng)操作室內(nèi)的氧氣含量達(dá)到極微量狀態(tài),,須經(jīng)三次氣體置換:(1)*次氣體置換,
純度為99.99%的氮?dú)?。操作如下?/span>
把乳膠手套套在法蘭圈上并扎緊,。按下箱內(nèi)氮?dú)膺M(jìn)開關(guān),氮?dú)饧催_(dá)到充足狀態(tài),,再按動(dòng)此開關(guān),,即關(guān)閉。雙手伸入乳膠手套,,并隨即踏腳踏開關(guān),,氮?dú)饧磿?huì)漸漸充入培養(yǎng)室。(2)第二次氣體置換(氮?dú)庵脫Q),,重復(fù)一次充氮過程,,取樣室先抽真空,并注意隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣,。(3)第三次置換混合氣體,,混合氣體配比為:N2↑90%、H2↑5%,、CO2↑5%,,純度均為99.99%。先將取樣室抽真空,,至真空表指針指向0.06MPa,。按下箱內(nèi)混合氣進(jìn)開關(guān),混合氣體達(dá)到充足狀態(tài),,再按動(dòng)此開關(guān),,即關(guān)閉。按下箱內(nèi)混合氣微調(diào)開關(guān),,使混合氣體按一定的流量充入培養(yǎng)室,。通過三次換氣后,培養(yǎng)操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài),。
4,、培養(yǎng)操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧。
5,、用戶使用前或使用后如需操作培養(yǎng)室,、取樣室滅菌,可打開內(nèi)置培養(yǎng)箱外門即取樣室內(nèi)門,,后開啟控制面板殺菌開關(guān),,可將操作室等進(jìn)行滅菌處理。時(shí)間長短可根據(jù)用戶實(shí)際需要自定,。操作該功能注意事項(xiàng)詳見系統(tǒng)化“注意事項(xiàng)”第(7)條,。
第二步、將菌種置入和培養(yǎng)
1,、檢查取樣室內(nèi)門并將它關(guān)緊,。
2、打開取樣室外門,,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門,。
3、完成取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,,先抽真空至0.06MPa以上停,,然后人工打開過道氮?dú)膺M(jìn)開關(guān),當(dāng)指針回復(fù)零位后關(guān)掉過道氮?dú)膺M(jìn)開關(guān),。重復(fù)以上操作進(jìn)行第二次氮?dú)庵脫Q,。第三次氣體置換操作時(shí),抽真空度0.06MPa以上停,,然后打開過道混合氣進(jìn)開關(guān)充進(jìn)混合氣體,,當(dāng)指針回復(fù)零位后關(guān)掉過道混合氣進(jìn)開關(guān)。取樣室充氣置換三次過程結(jié)束,。
4,、為保證培養(yǎng)操作室厭氧環(huán)境不被破壞,選取較低真空度進(jìn)行充氮置換時(shí)應(yīng)增加置換次數(shù),。
5、開啟取樣室內(nèi)門,,將菌種從取樣室移入培養(yǎng)操作室,,再將取樣室內(nèi)門關(guān)緊,再抽真空檢
查內(nèi)門是否關(guān)緊,。
6,、如培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用,則必須:(1)每天在培養(yǎng)操作室內(nèi)觀察,,如發(fā)現(xiàn)不正常就必須更換氣體,。(2)如用戶在操作時(shí),,由于產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的原因,在停止供氣12小時(shí)以后,,有可能存在極微量的滲漏,,或培養(yǎng)所需菌種需求要求微量混合氣體的補(bǔ)充時(shí),可經(jīng)內(nèi)置過濾器連續(xù)輸入微量的混合氣體,,使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难鯕饨Y(jié)合并被催化吸收,,保證箱內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量為每分鐘10ml左右,。(3)連續(xù)培養(yǎng)一天,,更換一次除氧劑和干燥劑。
7,、培養(yǎng)操作室內(nèi)溫度可在溫控范圍內(nèi)任意選擇和控制,。
8、混合氣瓶,,氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,,使輸出壓力為0.02Mpa左右。
注意事項(xiàng)及產(chǎn)品維護(hù)和保養(yǎng):
1,、儀器盡可能安裝在空氣清潔,,溫度變化較小的地方。
2,、開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器,、儀表的使用說明書,掌握正確使用方法,。
3,、培養(yǎng)物必須在培養(yǎng)操作室達(dá)到無氧環(huán)境后放入。
4,、如發(fā)生故障(停氣等原因)培養(yǎng)操作室內(nèi)仍可保持12小時(shí)厭氧狀態(tài),。(超過12小則需要把培養(yǎng)物取出另作處理)。
5,、經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象,。
6、當(dāng)氣瓶氣體用盡,,總輸出壓力小于0.1Mpa時(shí),,應(yīng)盡快調(diào)換氣瓶,調(diào)換氣瓶時(shí)注意要扎緊氣管,,避免管內(nèi)流入含氧氣體,。
7、殺菌燈如需開啟時(shí),,由于殺菌燈管能輻射出強(qiáng)烈的2537Å短波紫外線,,對核酸蛋白質(zhì)作用特別強(qiáng),。能使細(xì)菌發(fā)生變異殺死,同時(shí),,紫外線對有機(jī)細(xì)胞具有殺傷力,。人的眼睛和皮膚較長時(shí)間暴露在紫外線下會(huì)造成灼傷。所以,,必須開啟時(shí)應(yīng)拿出操作室或培養(yǎng)室中的培養(yǎng)物,。開啟后應(yīng)及時(shí)離開紫外線輻射之外,以免造成人體不舒,,如頭痛,、胸悶、暈眩等現(xiàn)象,。
8,、整機(jī)無電,可檢查電源插入端有無220V電源插入,,如有電源可拔下插頭,,檢查控制面板上熔斷器是否熔斷。如屬熔斷需有電工或電器知識的人員調(diào)換或檢修,,也可垂詢生產(chǎn)廠家,,請勿自行調(diào)換,以免可能發(fā)生意外和造成不需要的損失,。
9,、在初設(shè)氣體置換或培養(yǎng)結(jié)束釋放混合氣體時(shí),應(yīng)打開實(shí)驗(yàn)室門窗或?qū)⑼L(fēng)口打開,,以加速氣體的流通,。減少釋放氣體超標(biāo)吸入人體而引起不適。
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