探究奧林巴斯顯微鏡鏡象亮度以及視野大小的關(guān)鍵所在
鏡象亮度指的是奧林巴斯顯微鏡中所看到的物象的亮暗程度,。要看清楚物體的細(xì)節(jié),,必須要求一定的亮度,,也就是鏡象亮度,,它與數(shù)值孔徑的平方成正比,,與總放大倍數(shù)的平方成反比,。在物鏡相同的情況下,,使用5X的目鏡比使用10X的目鏡,鏡象亮度要大四倍,,所以要想使鏡象亮度大,,可以使用大數(shù)值孔徑的物鏡,配以低放大倍數(shù)的目鏡,。
比方說,,使用40X的N.A.為0.65的物鏡配以5X的目鏡和使用10x的N.A.為0.25的物鏡配以20X的目鏡相比較,雖然總放大率都是200X,,可是前者的鏡象亮度比后者大六點八倍,。在實際觀察物體的時候,并不是鏡象越亮越好,假如鏡象亮度太大,,一通過標(biāo)本的光線太強,,會影響圖象的反差且不利于保護眼睛視力,因此要求將鏡象亮度調(diào)至適中,,同時根據(jù)不同標(biāo)本厚度加以調(diào)節(jié),,對于厚的標(biāo)本可以適當(dāng)增加亮度,反差好的標(biāo)本也可適當(dāng)增加亮度,。
而且所謂的視野指的是是視場,,說白了就是顯微鏡一次所能觀察到被檢標(biāo)本的范圍。通常來講顯微鏡的視野是很小的,,它的大小和顯微鏡的總放大倍數(shù)成反比,,總放大倍數(shù)越大的時候,顯微鏡的視野越小,。所以奧林巴斯顯微鏡尤其是高放大倍數(shù)情況下,,不可能在一個視野內(nèi)看到整個標(biāo)本,只能觀察到標(biāo)本的某個部位,。假如需妥觀察標(biāo)本的其他部位的時候,,一定要利用移動器移動標(biāo)本,使標(biāo)本中的各部分依次進入視野內(nèi),,輪流觀察,。
光學(xué)顯微鏡的幾個主要性能之間有著一定的相互關(guān)系。是不是看清楚小的物體或細(xì)節(jié),,主要決定于物鏡的分辨率,,也就是數(shù)值孔徑,并不決定于倍數(shù),,認(rèn)為倍數(shù)越高看得越清楚的想法是不*正確的,。假如不增高分辨率。只是盡量增大倍數(shù),,雖然能夠獲得更高的放大倍數(shù)的圖象,,可是并不可能看出更多的細(xì)節(jié),這種放大叫做“空的放大",。為了充分利用物鏡的分辨率,,奧林巴斯顯微鏡的總放大倍數(shù)相應(yīng)也不能太小,不然的話本來可以看清楚的一些物體細(xì)節(jié),,會因為總放大倍數(shù)過小,擠在一起而分辨不出,。
同一物鏡分辨率隨放大倍數(shù)增大而提高,,隨倍數(shù)減小而降低,例如數(shù)值孔徑為0.65的物鏡,在總放大倍數(shù)小于一百六十倍的時候,,分辨率降為7微米,,當(dāng)總放大倍數(shù)增至一千六百倍的時候,分辨率提高到1.6微米以上,。
顯微鏡合適的總放大倍數(shù)決定于物鏡數(shù)值孔徑N.A.值的500倍至1000倍,,假如N.A.值為0.65的40倍物鏡,合適的總放大倍數(shù)應(yīng)為0.65x500倍,。0.65x1000即325倍至650倍,。所以,為了達到合適的總放大倍數(shù)應(yīng)配合適當(dāng)倍數(shù)的目鏡,。