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色譜的相關(guān)信息

時(shí)間:2014/6/17閱讀:4335
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色譜的相關(guān)信息
色譜的原理
原理:由以上方法可知,,在色譜法中存在兩相,一相是固定不動(dòng)的,,我們把它叫做固定相,;另一相則不斷流過(guò)固定相,我們把它叫做流動(dòng)相,。

色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù),、吸附能力等親和能力的不同來(lái)進(jìn)行分離的。

使用外力使含有樣品的流動(dòng)相(氣體,、液體)通過(guò)一固定于柱中或平板上,、與流動(dòng)相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),,混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用,。

由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小,、強(qiáng)弱不同,,隨著流動(dòng)相的移動(dòng),混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡,,使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同,,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合,,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè),。


色譜的分類:
從兩相的狀態(tài)分類:

色譜法中,流動(dòng)相可以是氣體,,也可以是液體,,由此可分為氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。固定相既可以是固體,,也可以是涂在固體上的液體,,由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜,、液-固色譜,、液-液色譜。

另外,,還有一種超臨界流體色譜法(supercritical fluid chromatography SFC),,超臨界流體色譜是值用超臨界流體做流通相,以固體吸附劑(如硅膠)或鍵合到載體(或毛細(xì)管壁)上的高聚物為固定相的色譜法,。超臨界流體是在高于臨界壓力和臨界溫度時(shí)的一種物質(zhì)狀態(tài),,它既不是氣體也不是液體,但兼有氣體和液體的某些性質(zhì)(藥物色譜分析 主編丁黎 人民衛(wèi)生出版社2008年7月*版),。

液相色譜法(HPLC)是繼氣相色譜之后,,70年代初期發(fā)展起來(lái)的一種以液體做流動(dòng)相的新色譜技術(shù),。

液相色譜是在氣相色譜和經(jīng)典色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的。現(xiàn)代液相色譜和經(jīng)典液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的區(qū)別,。不同點(diǎn)僅僅是現(xiàn)代液相色譜比經(jīng)典液相色譜有較高的效率和實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化 操作,。經(jīng)典的液相色譜法,流動(dòng)相在常壓下輸送,,所用的固定相柱效低,,分析周期長(zhǎng)。而現(xiàn)代液相色譜法引用了氣相色譜的理論,,流動(dòng)相改為高壓輸送(zui高輸送壓力可達(dá)4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達(dá)幾萬(wàn)或幾十萬(wàn));同時(shí)柱后連有高靈敏度的檢測(cè)器,,可對(duì)流出物進(jìn)行連續(xù)檢測(cè),。因此,,液相色譜具有分析速度快,、分離效能高、自動(dòng)化等特點(diǎn),。所以人們稱它為高壓,、高速、或現(xiàn)代液相色譜法,。

HPLC 系統(tǒng)一般由液相色譜儀主要由進(jìn)樣系統(tǒng),、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng),、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成,。

其中高壓輸液泵、色譜柱,、檢測(cè)器是關(guān)鍵部件,。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機(jī),、自動(dòng)進(jìn)樣器,、預(yù)柱或保護(hù)柱、柱溫控制器等,,現(xiàn)代 HPLC 儀還有微機(jī)控制系統(tǒng),,進(jìn)行自動(dòng)化儀器控制和數(shù)據(jù)處理。制備型 HPLC 儀還備有自動(dòng)餾分收集裝置,。


 

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