液相色譜儀是目前應(yīng)用zui多的色譜分析方法
液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),， 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),， 在兩相中作相對運(yùn)動時(shí)， 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,， 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別， 被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,， 通過檢測器時(shí),， 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來,。
液相色譜儀是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。液相色譜儀與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,，小顆粒具有高柱效,，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相,，故又稱高壓液相色譜,。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。
液相色譜儀是目前應(yīng)用zui多的色譜分析方法,，液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶,、輸液泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜,，但是針對其流動相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整,。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn)；進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密,；由于液體流動相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,，為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱,。HPLC應(yīng)用非常廣泛,，幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。
使用液相色譜儀時(shí),，液體待檢測物被注入色譜柱,，通過壓力在固定相中移動,，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,，通過檢測器得到不同的峰信號,，zui后通過分析比對這些信號來判斷待側(cè)物所含有的物質(zhì)。液相色譜儀作為一種重要的分析方法,，廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中,。液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，液相色譜儀的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵,、高靈敏度檢測器和微粒固定相,，適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大,、不同極性的有機(jī)化合物,。
液相色譜儀儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運(yùn)動時(shí), 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時(shí), 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜儀利用氦氣在液體中溶解度比空氣低的特性,，在0.1MPa壓力下,，以約60mL/min流速通入流動相儲液容器中10～15min，可以很有效地從流動相中排除溶解的空氣,，能排除接近80%的氧氣,。液相色譜儀采用一個(gè)分布式噴射流裝置，一體積的氦氣可從流動相中將等體積的幾乎全部氣體排除,。這意味著1L氦氣通過1L流動相就可完成排氣這個(gè)工作,。這種脫氣方法雖然好，但氦氣價(jià)格較高,，很少使用,。
