系統(tǒng)由儲液器、泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),，在兩相中作相對運動時，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時,，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來高效液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng),、分離系統(tǒng),、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，下面將分別敘述其各自的組成與特點,。
液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器，特別講究“正確使用”和經(jīng)驗,。
液相工作者接觸最多的是流動相,，也就是流動相，是造成液相色譜各種問題的最主要源頭,。
“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高,，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,，最主要原因就是流動相里有雜質(zhì),，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌。
使用流動相時的細(xì)菌污染,。
指的是：
流動相剛開始沒有長菌,，在使用時卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時的一種不良使用習(xí)慣造成的,。
舉簡單的例子：
50%的甲醇水流動相,，有兩種使用方式。一種方式是在上機(jī)前就配好混合在一起,，另一種方式是在流路A放純甲醇,，流路B放純水。
從單純實驗效果來說,，后一種有明顯的優(yōu)點：首先是簡單,，不需要實驗者另個計算配比混合,，其次就是比例準(zhǔn)確，能得到保留時間重復(fù)性很好的實驗效果,。
但是,，它有一個致命的缺陷，就是純水在流動相瓶中幾天時間就會長細(xì)菌(很多情況下不僅僅用純水作流動相,，而是用緩沖鹽溶液,，本身就是優(yōu)質(zhì)肥料，細(xì)菌長得更迅速),，一旦有細(xì)菌柱子就壞得很快,。所以這種方式要求操作人員每次實驗都要用新制備的純水，更要求在每次實驗后把水相換掉,，換成甲醇沖洗干凈,，這一點在實際工作中很多人意識不強(qiáng)，就是意識到了但多次使用中總有一兩次會遺漏,，但是往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響,。因為液相色譜柱的堵塞是不可逆的。
所以,，寧可犧牲小小的保留時間的重復(fù)性,，也不要用純水溶液作為流動相的一組。從實際實驗效果來說,，我建議用10%的甲醇水代替純水溶液(以前我做過不同比例甲醇水的細(xì)菌總數(shù)實驗,，在5%就基本可以抑菌，在10%及以上就可以*殺菌了),，這樣可以有效排除長細(xì)菌的隱患,，既可作流動相，也可沖柱,。就算是在配制流動相時會計算得麻煩一些,，但是一次麻煩，終身受益,。
不適當(dāng)操作,。
常見問題的有以下幾種：
(1)在更換零件時選擇的型號有誤，接口不是很匹配,，在擰緊的時候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞,。
(2)樣品處理液凈化得不干凈，長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢,。
(3)在使用手動六通閥時,，有些人可能由于手勁小的原因，轉(zhuǎn)動的不到位，于是造成流路形成了死堵,，壓力快速升高超過警戒值,。
(4)在使用金屬管路作出廢液管時，應(yīng)當(dāng)注意最好廢液瓶中先放一些水,，并把廢液管的出口端放在液面下,。如果位于在液相上且實驗使用較高濃度的緩沖鹽溶液，在停機(jī)時可能在出口端結(jié)晶成塊并造成堵塞,。這種情況不常見,，但卻的確發(fā)生過。
