分光光度計是利用分光光度法,,通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,。不同種類的分光光度計的基本原理相似,,都是利用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,。光源透過測試的樣品后,,部分光源被吸收,通過測量樣品的吸光值,,經(jīng)過計算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計的檢驗小妙招:
1.波長準(zhǔn)確度的檢驗:
分光光度計在使用過程中,,由于機(jī)械振動,、溫度變化、燈絲變形,、燈座松動或更換燈泡等原因,,經(jīng)常會出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象,因而導(dǎo)致儀器靈明度降低,,影響測定結(jié)果的精度,,需要進(jìn)行檢驗。
檢驗波長準(zhǔn)確度簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值,,如果測出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定,,則需要進(jìn)行波長調(diào)節(jié)。
2.透射比正確度的檢驗:
用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10%,、20%,、30%左右的光譜中性濾光片,可見光區(qū)分別在440,、546,、635nm波長處,以空氣為參比,,分別測量各濾光片的透射比,,紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257,、313,、350nm波長處,以高氯酸溶液為參比,,測量其透射比,。
3.穩(wěn)定度的檢驗:
在零點(diǎn)不受光的條件下,,用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點(diǎn),,觀察3分鐘讀取透射比的變化,即為零點(diǎn)穩(wěn)定性,。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處,,調(diào)節(jié)零點(diǎn)后,,蓋上樣品室蓋(打開光門),使光電管受光,,調(diào)節(jié)透射比為95%(數(shù)顯儀器調(diào)至100%)察3分鐘讀取透射比的變化,,為光電流穩(wěn)定性。
4.光的檢驗:
分光光度計棱鏡式儀器在420nm處,,光柵式儀器在360nm處,,紫外分光計在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片,以空氣為參比,,測量其透射比值,,即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。
分光光度計廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生,、臨床檢驗,、生物化學(xué)、石油化工,、環(huán)境保護(hù),、質(zhì)量控制、司法刑偵,、檢驗檢疫林業(yè),、地質(zhì)勘探、食品檢測等行業(yè),,是理化實驗室常用的分析儀器之一,。