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722型分光光度計(jì)的使用方法

時(shí)間：2018/4/16閱讀：13508

一,、丈量原理
分光光度法丈量的理論依據(jù)是伯郎—比耳定律：當(dāng)容液中的物質(zhì)在光的照射和激發(fā)下，產(chǎn)生了對光吸收的效應(yīng),。但物質(zhì)對光的吸收是有選擇性的,，各種不同的物質(zhì)都有其各自的吸收光譜。所以根據(jù)定律當(dāng)一束單色光通過一定濃度范圍的稀有色溶液時(shí),，溶液對光的吸收程度A與溶液的濃度c（g/l）或液層厚度b(cm)成正比,。其定律表達(dá)式A=abc
（a是比例系數(shù)）。當(dāng)c的單位為mol/l時(shí),，比例系數(shù)用ε表示,，則A=εbc稱為摩爾吸光系數(shù)。其單位為L·mol-1·cm-1它是有色物質(zhì)在一定波長下的特征常數(shù),。
T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K·C·L(比色皿的厚度)
測定時(shí),，進(jìn)射光I, 吸光系數(shù)和溶液的光徑長度不變時(shí)，透過光是根據(jù)溶液的濃度而變化的，即“K”為常數(shù),。比色皿厚度一定,，“L”、“I0”也一定,。只要測出A即可算出“C”,。
《分光光度計(jì)的表頭上，一行是透光率,，一行是吸光度,。》
二,、 722型分光光度計(jì)的使用
1、將靈敏度旋鈕調(diào)至“1”檔（信號放大倍率zui?。?。
2、開啟電源,，指示燈亮 ,，選擇開關(guān)置于“T”，波長調(diào)至到測試用波長,。儀器預(yù)熱20分鐘,。
3、打開試樣室（光門自動封閉）,，調(diào)節(jié)透光率零點(diǎn)旋鈕,，使數(shù)字顯示為000.0。（調(diào)節(jié)100%T旋鈕）,，蓋上試樣室蓋,，將比色皿
架處于蒸餾水校正位置，使光電管受光,，調(diào)節(jié)透光率100%旋鈕使數(shù)字顯示100.0,。如顯示不到100.0，則可適當(dāng)增加微電放逐大的倍數(shù),。（增加靈敏度
的檔數(shù)同時(shí)應(yīng)重復(fù)（3）調(diào)節(jié)儀器透光率的“0”位）但盡量使倍率置于低檔使用,。這樣儀器會有更高的穩(wěn)定性。
4,、預(yù)熱后,，按（3）連續(xù)幾次調(diào)整透光率的“0”位和“100%”的位置，待穩(wěn)定后儀器可進(jìn)行測定工作,。
三,、吸光度“A”的丈量
將選擇開關(guān)置于A 。調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕,，使得數(shù)字顯示為零,，然后將被測樣品移進(jìn)光路,，顯示值即為被測樣品的吸光度值。
四,、濃度c的丈量
將選擇開關(guān)由“A”旋至“C”將已標(biāo)定濃度的樣品放進(jìn)光路,，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值,，將被測樣品放進(jìn)光路即可讀出被測樣品的濃度值,。
留意事項(xiàng)：
1、丈量完畢,，速將暗盒蓋打開,，封閉電源開關(guān)，將靈敏度旋鈕調(diào)至zui低檔,，取出比色皿,，將裝有硅膠的干燥劑袋放進(jìn)暗盒內(nèi)，關(guān)上蓋子,，將比色皿中的溶液倒進(jìn)燒杯中,，用蒸餾水洗凈后放回比色皿盒內(nèi)。
2,、每臺儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表面皿單個調(diào)換,。
使用方法
（1）預(yù)熱儀器將選擇開關(guān)置于“T”，打開電源開關(guān),，使儀器預(yù)熱20分鐘,。為了防止光電管疲憊，不要連續(xù)光照,，預(yù)熱儀器時(shí)和不測定時(shí)應(yīng)將試樣室蓋打開,，使光路切斷。
（2）選定波長根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,，轉(zhuǎn)動波長手輪,，調(diào)至所需要的單色波長。
（3）固定靈敏度檔在能使空缺溶液很好地調(diào)到“100%”的情況下,，盡可能采用靈敏度較低的擋,，使用時(shí)，首先調(diào)到“1”擋,，靈敏度不夠時(shí)再逐漸升高,。但換擋改變靈敏度后，須重新校正“0%”和“100%”,。選好的靈敏度,，實(shí)驗(yàn)過程中不要再變動。
（4）調(diào)節(jié)T=0% 輕輕旋動“0%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”,，（此時(shí)試樣室是打開的）,。
（5）調(diào)節(jié)T=100% 將盛蒸餾水（或空缺溶液，或純?nèi)軇┑谋壬蠓胚M(jìn)比色皿座架中的*格內(nèi),，并對準(zhǔn)光路,，把試樣室蓋子輕輕蓋上，調(diào)節(jié)透過率“100%”旋鈕,，使數(shù)字顯示正好為“100.0”,。
（6）吸光度的測定將選擇開關(guān)置于“A”，蓋上試樣室蓋子,，將空缺液置于光路中,，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)節(jié)旋鈕，使數(shù)字顯示為“.000”,。將盛有待測溶液的比色皿放進(jìn)比色皿座架中的其它格內(nèi),，蓋上試樣室蓋，輕輕拉動試樣架拉手,，使待測溶液進(jìn)進(jìn)光路，此時(shí)數(shù)字顯示值即為該待測溶液的吸光度值,。讀數(shù)后,，打開試樣室蓋，切斷光路,。
重復(fù)上述測定操縱1-2次,，讀取相應(yīng)的吸光度值，取均勻值,。
（7）濃度的測定選擇開關(guān)由“A”旋置“C”,，將已標(biāo)定濃度的樣品放進(jìn)光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕,，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值,，將被測樣品放進(jìn)光路，此時(shí)數(shù)字顯示值即為該待測溶液的濃度值,。
（8）關(guān)機(jī) 實(shí)驗(yàn)完畢,，切斷電源，將比色皿取出洗凈,，并將比色皿座架用軟紙擦凈,。

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