液相色譜儀（high performance liquid chromatography,HPLC）也叫高壓液相色譜（high pressure liquid chromatography）,、高速液相色譜（high speed liquid chromatography）,、高分離度液相色譜（high resolution liquid chromatography）等或Efficient liquid chromatographyspectrometry,。是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的,。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,，小顆粒具有高柱效,，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相,，故又稱高壓液相色譜,。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。
液相色譜是目前應(yīng)用zui多的色譜分析方法,，液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶,、輸液泵、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜,，但是針對其流動相為液體的特點作出很多調(diào)整,。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn)；進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密,；由于液體流動相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,，為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗，長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱,。HPLC應(yīng)用非常廣泛,，幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。
使用液相色譜時,，液體待檢測物被注入色譜柱,，通過壓力在固定相中移動，由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,，通過檢測器得到不同的峰信號,，zui后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì)。液相色譜作為一種重要的分析方法,，廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中,。液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別，它的特點是采用了高壓輸液泵,、高靈敏度檢測器和微粒固定相,，適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大,、不同極性的有機(jī)化合物,。
液相色譜儀的發(fā)展歷史
1960年代，由于氣相色譜對高沸點有機(jī)物分析的局限性,，為了分離蛋白質(zhì),、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜,。1960年代末科克蘭（Kirkland）,、哈伯、荷瓦斯（Horvath),、莆黑斯,、里普斯克等人開發(fā)了世界上*臺液相色譜儀，開啟了液相色譜的時代,。液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱,，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅(qū)動流動相,，使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個小時甚至幾十分鐘內(nèi)完成,。
1971年科克蘭等人出版了《液相色譜的現(xiàn)代實踐》一書，標(biāo)志著液相色譜法(HPLC）正式建立,。在此后的時間里,，液相色譜成為zui為常用的分離和檢測手段，在有機(jī)化學(xué),、生物化學(xué),、醫(yī)學(xué)、藥物開發(fā)與檢測,、化工,、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測,、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用,。液相色譜同時還極大的刺激了固定相材料,、檢測技術(shù)、數(shù)據(jù)處理技術(shù)以及色譜理論的發(fā)展,。
1960年代前,，使用的填充粒大于100μm，提高柱效面臨著困境,，后來的研究人員便采用微粒固定相來突破著一瓶頸,。
