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當(dāng)前位置:上海一基實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制等詳細(xì)說明書
RPMI-1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基是zui常用的一種培養(yǎng)基,,由 Moore et al 在1967 年為人的白血球細(xì)胞開發(fā)的,并以他所在的研究所(RoswellPark Memorial Institute)而命名,。目前用于多種動物細(xì)胞的生長,。
高壓滅菌型是該培養(yǎng)基的熱穩(wěn)定配方,可保證其營養(yǎng)成份在高壓高熱中不受影響,。該配方中不含 L-谷氨酰胺及碳酸氫鈉,,需在高溫滅菌后添加。
產(chǎn)品型號
RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含 L-谷氨酰胺,,不含碳酸氫鈉
RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含 L-谷氨酰胺,,不含酚紅,,不含碳酸氫鈉
RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,不含 L-谷氨酰胺,,不含碳酸氫鈉
RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含 L-谷氨酰胺,含 HEPES,,不含碳酸氫鈉
RPMI1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,高壓滅菌型,不含 L-谷氨酰胺,,不含碳酸氫鈉
產(chǎn)品規(guī)格
干粉(1L, 10L 及 100L),; 液體(500 ml)
配制方法
干粉培養(yǎng)基的過濾配制
1 將 1 升量的干粉在 950ml 細(xì)胞培養(yǎng)級純凈水中*溶解
2 加入 2 克碳酸氫鈉,繼續(xù)攪拌至*溶解
3 用 1N 鹽酸或 1N 氫氧化鈉調(diào)整到要求的 pH,,并將溶液體積調(diào)至1000ml
4 在超凈臺內(nèi)用 0.22um 濾膜負(fù)壓過濾
5 將培養(yǎng)基在 2~8℃避光保存
高壓滅菌型的配制
1 將 1 升的高壓滅菌型干粉在 900ml 細(xì)胞培養(yǎng)級純凈水中*溶解
2 將溶液 pH 調(diào)至 4.0 并將溶液體積調(diào)至 960ml
3 在 121℃,,15psi 高壓消毒 5 分鐘
4 將培養(yǎng)基迅速取出,避免過久加熱引起成份分解或液體蒸發(fā)減少
5 待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,,無菌操作加入 29.3ml 的無菌 7.5%碳酸
氫鈉溶液,,及 10ml 的無菌 200mM L-谷氨酰胺
6 如有必要,用無菌的 1N 鹽酸或 1N 氫氧化鈉調(diào)整 pH
7 將培養(yǎng)基在 2~8℃避光保存
自備材料
細(xì)胞培養(yǎng)級或注射級純水
7.5%碳酸氫鈉溶液(無菌)
200mM 谷氨酰胺溶液(無菌)
1 N 鹽酸溶液(無菌)
1 N 氫氧化鈉溶液(無菌)
質(zhì)檢指標(biāo)
形狀:淡黃色均勻粉末(干粉),,澄清透明(液體)
溶解:干粉按要求溶解后澄清透明
pH 值:(加碳酸氫鈉前)4.4-5.0(加碳酸氫鈉后)(液體)7.4-8.0
滲透壓:(加碳酸氫鈉前)230-270(加碳酸氫鈉后)280-320 (液 體)
菌落:每克小于 100cfu (干粉),,無菌(液體)
細(xì)胞生長:正常(干粉及液體)
儲存及注意事項
1 所有的液體及干粉培養(yǎng)基應(yīng)在 2~8℃避光保存,并在有效期內(nèi)使用。
2 щ 倇或沉淀,。
3 液體培養(yǎng)基的 pH 儲存時會因為二氧化碳的逃逸而發(fā)生改變,。建議盡量減少開瓶次數(shù)。
4 滅菌后的液體培養(yǎng)基添加物應(yīng)無菌并在無菌操作下添加,。
5 干粉培養(yǎng)基吸濕性強(qiáng),,極易吸水變質(zhì)。粉包打開后應(yīng)全部使用或剩余舍棄,。
注意:
本產(chǎn)品于研發(fā)生產(chǎn)使用,。
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