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不同化學轉染方法的優(yōu)點與缺點是什么?

時間:2024/5/13閱讀:431
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化學法轉染技術已廣泛應用于細胞的穩(wěn)定或瞬時轉染,,那么你知道不同化學轉染方法的優(yōu)點與缺點是什么嗎,?讓我們一起來看看吧!

一,、陽離子脂質體

優(yōu)點:

1.操作快速簡單,。

2.結果可重復。

3.轉染效率高,。

4.可轉染DNA,,RNA和蛋白質。

5.適用于生產瞬時和穩(wěn)定的蛋白質,。

6.可用于體內轉染,。

缺點:

1.需進行條件優(yōu)化(一些細胞系對陽離子脂質體較敏感)

2.有些細胞系不容易轉染,。

3.血清的存在干擾復合物的形成,,導致低轉染效率。

4.培養(yǎng)基中血清的缺失會增加細胞毒性,。

二,、磷酸鈣共沉淀

優(yōu)點:

1.便宜且容易獲得。

2.適用于生產瞬時和穩(wěn)定的蛋白質,。

3.轉染效率高(不限制細胞系)。

缺點:

1.需要仔細制備試劑  CaPO4溶液對pH,,溫度和緩沖鹽濃度的變化敏感,。2.可重復性較差。

3.有細胞毒性,,尤其對原代細胞,。

4.不能采用RPMI培養(yǎng)基,由于其含高濃度的磷酸鹽,。

5.不適用于動物體內轉染,。

三、葡聚糖:

優(yōu)點:

1.操作簡單,。

2.結果可重復,。

3.便宜。

缺點:

1.對某些細胞有化學毒性,。

2.只限于瞬時轉染,。

3.轉染效率低,,尤其在原代細胞中。

四,、其他陽離子聚合物

優(yōu)點:

1.在血清中穩(wěn)定,,對溫度不敏感。

2.高轉染效率(限制細胞系),。

3.結果可重復,。

缺點:

1.對某些細胞有毒性。

2.不能生物降解(樹枝狀大分子),。

3.只限于瞬時轉染,。


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