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超氧陰離子試劑盒提取方法

時(shí)間:2024/5/7閱讀:443
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測定意義:



生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導(dǎo)的作用,但積累過多時(shí)會對細(xì)胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,,導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞和組織代謝異常,,從而引起多種疾病。

測定原理:

超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2,,NO2在對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,,根據(jù)A530值可以計(jì)算樣品中O2含量,。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、水浴鍋,、離心機(jī),、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板,、lv仿和蒸餾水,。

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存,。

試劑一:液體8mL×1瓶,,4℃保存。

試劑二:液體6mL×1瓶,,4℃避光保存,。

試劑三:液體6mL×1瓶,4℃避光保存,。

試劑四:lv仿,,自備。

超氧陰離子提取

1. 植物,、動物組織:稱取約0.1g樣本,加入提取液1mL,,充分研磨,,12000rpm,4℃,,離心20min,,取20μL上清測定蛋白含量,,其余上清作為待測樣本。

2. 血清或培養(yǎng)液:直接測定,。


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