上海一基實(shí)業(yè)有限公司是一家集經(jīng)銷批發(fā)、招商代理的有限責(zé)任公司,,是一家經(jīng)國家相關(guān)部門批準(zhǔn)注冊(cè)的企業(yè),。主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細(xì)胞,、血清,、抗體、生物試劑,、培養(yǎng)基,、等產(chǎn)品,具體請(qǐng).
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本試劑盒只能用于科學(xué)研究,,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠白介素1α(IL-1α)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,,溫育足夠時(shí)間后,,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,,溫育足夠時(shí)間后,,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A,、B,,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,,顏色的深淺與樣品中大鼠白介素1α(IL-1α)濃度呈正相關(guān),,450nm波長下測定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,,計(jì)算樣本中大鼠白介素1α(IL-1α)含量,。 8,、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板),。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min,。
10、終止:取出酶標(biāo)板,,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11,、測定:以空白孔調(diào)零,,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12,、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù),。
【大鼠白介素1α(IL-1α)Elisa試劑盒樣本要求】
1,、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)?/span>疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑,。
2,、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3、樣本應(yīng)充分離心,,不得有溶血及顆粒,。
【大鼠白介素1α(IL-1α)Elisa試劑盒注意事項(xiàng)】
1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。
2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存,。
3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品,、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測,,取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差,。
4,、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度,。
5,、本試劑盒定量范圍為1.5-48ng/L,超過此范圍,,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(1.5-48ng/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度,。
6,、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時(shí)間,。
7,、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品,、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭,;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,,要懸臂加樣,,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜,。
8,、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用,。
9,、底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下,。
【大鼠白介素1α(IL-1α)Elisa試劑盒操作程序總結(jié)】
準(zhǔn)備試劑,,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板4次,,加入酶標(biāo)試劑,,37℃反應(yīng)30分鐘
洗板4次,加入顯色液A,、B,,37℃顯色15分鐘
加入終止液
15分鐘之內(nèi)讀OD值
計(jì)算
【大鼠白介素1α(IL-1α)Elisa試劑盒檢測范圍】
1.5ng/L - 48ng/L
【大鼠白介素1α(IL-1α)Elisa試劑盒規(guī)格】
96人份/盒
【大鼠白介素1α(IL-1α)Elisa試劑盒貯藏】
2-8℃,避光防潮保存,。
【大鼠白介素1α(IL-1α)Elisa試劑盒有效期】
6個(gè)月