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上海凱朗儀器設(shè)備廠
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二氧化碳培養(yǎng)箱無污染控制技術(shù)
2012-5-14 閱讀(1661)
| 提 供 商 | 上海凱朗儀器設(shè)備廠 | 資料大小 | 30KB |
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二氧化碳培養(yǎng)箱無污染控制技術(shù)
二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度（37°C）,、穩(wěn)定的CO2水平（5%）,、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對濕度（95%）,，來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置,。 廣泛應用于細胞,、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),，常見于細胞動力學研究、哺乳動物細胞分泌物的收集,、各種物理,、化學因素的致癌或毒理效應、抗原的研究和生產(chǎn),、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)抗體,、體外授精（IVF）、干細胞,、組織工程,、藥物篩選等研究領(lǐng)域。
在生物活體內(nèi),，生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護細胞或組織,，但是在體外培養(yǎng)時，沒有任何保護自己的免疫屏障,。對于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度,、CO2 和濕度，大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究實驗的需要,。然而,，針對培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源，各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,，因此細胞體外培養(yǎng)中zui大的威脅實際上是污染問題,。
二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：細菌、真菌（霉菌和酵母菌）,、病毒,、支原體,、非同種細胞。
對于細胞來說,，非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,，培養(yǎng)箱本身是不會辨別的，而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),，因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵,！
細菌：細菌污染后，培養(yǎng)基1-2天就會變色,，對細胞生長影響明顯,，應迅速將污染細胞與其它細胞系隔離，滅菌后丟棄,，還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,。
病毒：由于病毒寄生生存，爆發(fā)后盡快和正常細胞隔離,，丟棄處理，相對來說容易處理,，對操作者威脅較大,；盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但生產(chǎn)疫苗是不安全的,。因此，潛在病毒是細胞大量生產(chǎn)和疫苗,、干擾素等生物制品制作中的難題,。
真菌（霉菌和酵母菌）：真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn),，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了；目前沒有好的抑制方法,，包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,，一旦污染容易反復爆發(fā)，尤其孢子很難殺滅。
支原體：支原體污染后,，因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存,，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細胞無明顯變化,，外觀上給人以正常感覺，實則細胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,，如引起細胞變形，影響DNA合成,，抑制細胞生長等，往往被大多數(shù)實驗者忽視,。
非同種細胞：即細胞交叉污染,，由于細胞培養(yǎng)操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開，往往會使一種細胞被另一種細胞污染,。目前,，世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,，致使許多實驗宣告無效,。
因此,，以上污染一旦發(fā)生,，細胞zui后基本只能丟棄,，實驗無法挽救，對于許多取樣困難的實驗損失無法估量,！
目前,，二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)主要有干熱,、濕熱,、紫外燈照射,、消毒劑擦拭等。
高溫干熱空氣滅菌是目前*的zui有效的滅菌技術(shù),，能*消滅所有微生物污染源（包括耐高溫的芽孢桿菌）；濕熱滅菌通常用于高壓蒸汽滅菌中,，比較少用在CO2培養(yǎng)箱上,，濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法，煮沸的水溫一般至少需為100℃,，細菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死，但芽胞常需煮沸2小時以上才可被殺死,；紫外燈照射法的有效性受很多因素影響，如遮擋,、時間、強度,、照射距離，濕度等,，滅菌效果很難保證；消毒劑擦拭法是對表面滅菌的方法,，適合于平整的表面如實驗臺面，而箱體內(nèi)部設(shè)計的死角、各種器件因無法擦拭等因素導致滅菌效果也很有限,，而且含氯、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕作用,，不能對不銹鋼箱體進行擦拭滅菌。
英國LEEC TOUCH 190S CO2培養(yǎng)箱是高品質(zhì)培養(yǎng)箱的代表之作,，其中在無污染控制方面，它采用高達200℃的高溫干熱空氣滅菌技術(shù),，而且整個滅菌過程僅需7個小時,，相比較其它品牌的多達十幾個小時的滅菌過程，LEEC在保證*消滅所有微生物污染源的同時,，也為客戶節(jié)省大量寶貴的實驗時間,，越來越受到客戶的青睞。
在箱體的設(shè)計上,，英國LEEC TOUCH190S CO2培養(yǎng)箱也從多方面進行了抑菌設(shè)計：（1）外體采用不銹鋼材質(zhì),，外加抗菌涂層；（2）內(nèi)壁采用拋光不銹鋼材質(zhì),，研究顯示拋光不銹鋼能夠明顯降低污染物的生長,； （3）單片成型內(nèi)腔，無焊接,，沒有縫隙,，*；（4）HEPA空氣過濾器設(shè)計,，能夠有效的過濾掉進氣潛在的污染源和顆粒雜質(zhì),；（5）無風扇循環(huán)，空氣只靠自然對流運動,，沒有裝配通風管道等不易拆除不易清潔的零部件，使清潔工作更為簡便,，消除了導致細胞培養(yǎng)交叉污染的一大源頭,。
因此，英國LEEC TOUCH 190S CO2培養(yǎng)箱不但能為細胞生長提供的體外模擬環(huán)境,，更讓您的細胞培養(yǎng)全程安全無憂,，是細胞培養(yǎng)箱的未來發(fā)展方向,！
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