壓力不穩(wěn)是高壓液相色譜儀(HPLC)zui為常見的故障,其表現(xiàn):①壓力在一段時(shí)間逐漸變化(升高或降低),;②壓力瞬間變化(>3kg)??偨Y(jié)原因不 外乎以下四種情況:⑴有氣泡,;(2)漏液;(3)單向閥不良,;(4)泵工作相位不正確,。對(duì)于①這種情況:一般是在開機(jī)的一段時(shí)間內(nèi)出現(xiàn),往往是流動(dòng)相在色 譜柱內(nèi)還沒有平衡好,、柱箱溫度還沒有恒定,。這些都不屬于儀器問題,只要多平衡一會(huì)就會(huì)穩(wěn)定,。若使用的是梯度程序,,由于流動(dòng)相的比例正處在變化中,壓力也會(huì) 跟隨變化,。對(duì)于第②種情況:通過下面幾步分析,,很快就可以確定原因。
首先排除氣泡因素:氣泡的產(chǎn)生是由于流動(dòng)相中溶解了空氣,,在泵壓的作用下空氣會(huì)分離出來,,氣泡留在泵體內(nèi)排不出去,它不僅影響到流量的準(zhǔn)確,,泵壓也會(huì)不 穩(wěn),,這時(shí)我們只要打開排廢閥,利用快速?zèng)_洗功能很快就能將氣泡趕出,。為防止氣泡產(chǎn)生,,的辦法就是使用在線脫氣裝置。沒有脫氣機(jī)時(shí),,流動(dòng)相要經(jīng)過脫氣處 理,。超聲波震蕩是常用的除氣泡方法,雖然簡(jiǎn)單但效果不佳,,不妨將流動(dòng)相用微孔濾膜多過濾兩遍,,利用真空泵的負(fù)壓,將溶解在流動(dòng)相中的空氣釋放出來,,其效果 要好些,。如果使用中我們發(fā)現(xiàn),,連接過濾頭的輸液管中有微小的氣泡流動(dòng)時(shí),這說明過濾頭有堵塞現(xiàn)象必須清洗,,你可用10%的硝酸進(jìn)行超聲15分鐘,,如果還有 氣泡產(chǎn)生那就該換新濾頭了。