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1)樣品提?。喝》鬯椴⑦^20目篩的大豆樣品20g(至0.1g)于250mL具塞錐形瓶中,,加入甲醇-水(體積比為80:20)混合溶液50mL,,超聲提取10min,。在鋪有助濾劑的布氏漏斗中減壓抽濾,。用甲醇-水(體積比為80:20)混合溶液20mL沖洗錐形瓶及濾渣,,合并濾液,移人分液漏斗,,加入5%氯化鈣溶液80mL,,用三氯甲烷萃取3次(50mL,40mL,40mL),。萃取液過無水硫酸鈉脫水,,置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中于4O℃下減壓濃縮至近干,移人填充柱內(nèi)凈化,。
(2)樣品凈化:用干裝法裝柱,。在玻璃柱(20cmx1.5cmi.d.)內(nèi)依次加入1g助濾劑、2g硅膠,、0.5g活性炭及少許無水硫酸鈉,。先用20mL乙酸乙酯-石油醚(體積比為95:5)混合淋洗液預(yù)淋玻璃柱,棄去淋洗液,,爾后用3×1mL混合淋洗液溶解濃縮物并轉(zhuǎn)移到柱中,,然后用70mL乙酸乙酯-石油醚(體積比為95:5)混合溶液淋洗,棄去前5mL淋洗液,,收集以后流出的淋洗液,,在4O℃下減壓濃縮至近干,用氮?dú)饬鞔蹈珊鬁?zhǔn)確加入甲醇定容至lmL,,供HPLC測定,。
2結(jié)果與討論
2.1提取方法的選擇
分別對大豆的提取方式與條件進(jìn)行試驗(yàn),比較了振蕩提取和超聲波提取的效果,。結(jié)果表明,,振蕩提取40min和超聲波提取10min的效果是一致的。為了節(jié)約時間,,確定采用超聲波提取10min,。
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