保存時(shí)間漂移的幾種zui常見的原因
保存時(shí)間不重現(xiàn)有兩種不同的情況：即保存時(shí)間漂移和保存時(shí)間波動(dòng),。前者是指保存時(shí)間僅沿單方向發(fā)生變化,，而后者指保存時(shí)間無固定規(guī)律的波動(dòng),。將此兩種情況區(qū)分開來對找到題目的原因往往很有幫助,。如,，保存時(shí)間的漂移往往由柱老化引起,；而柱老化不可能引起保存時(shí)間的無規(guī)律波動(dòng),。事實(shí)上,，保存時(shí)間漂移的多半原因是不同機(jī)理的色譜柱老化,，如固定相流失（例如通過水解），色譜柱污染（由樣品或活動(dòng)相所致）等,。保存時(shí)間漂移的幾種zui常見的原因如下：  

    一色譜柱平衡 

            假如我們觀察到保存時(shí)間漂移，首先應(yīng)考慮色譜柱是否已用活動(dòng)相*平衡。通常平衡需要10-20個(gè)柱體積的活動(dòng)相,，但假如在活動(dòng)相中加進(jìn)少量添加劑（如離子對試劑）則需要相當(dāng)長的時(shí)間來平衡色譜柱,。 酸堿度計(jì)| 電導(dǎo)計(jì)| 水分測定儀| 濁度計(jì)| 色度計(jì)| 粘度計(jì)| 折射計(jì)| 滴定儀| 密度計(jì)| 熱流計(jì)| 濃度計(jì)| 折射儀| 采樣儀| 

            活動(dòng)相污染也可能是原因之一,。溶于活動(dòng)相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上,，從而造成保存時(shí)間的漂移,。應(yīng)留意：水是很輕易污染的活動(dòng)相成分。 

    二固定相穩(wěn)定性 

           固定相的穩(wěn)定性都是有限的，即使在推薦的PH范圍內(nèi)使用，固定相也會(huì)慢慢水解,。例如,，硅膠基質(zhì)在pH4時(shí)水解穩(wěn)定性,。水解速度與活動(dòng)相類型和配體有關(guān),。雙官能團(tuán)配體和三官能團(tuán)配體比單官能團(tuán)配體的鍵合相要穩(wěn)定；長鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩(wěn)定,；烷基鍵合相比氰基鍵合相穩(wěn)定的多。 

           經(jīng)常清洗色譜柱亦會(huì)加速色譜柱固定相的水解。其他硅膠基質(zhì)鍵合相在水溶液環(huán)境中也可以發(fā)生水解,，如氨基鍵合相等,。 

    三色譜柱污染 

            保存時(shí)間漂移的另一個(gè)常見原因是色譜柱污染。HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器,，它可以過濾并吸附活動(dòng)相攜帶的任何物質(zhì),。污染源可以是：活動(dòng)相本身，活動(dòng)相容器,，連接管,、泵、進(jìn)樣器和儀器密封墊,，以及樣品等,。通常通過實(shí)驗(yàn)可判定污染的來源。 

            樣品中假如存在色譜柱上保存很強(qiáng)的組分,，就可能是使保存時(shí)間漂移的潛伏根源,。這些根源通常是樣品基質(zhì)。如：配藥中的賦形劑,，生化樣品（如血清）中的蛋白及類脂類化合物,，食品樣品中的淀粉，環(huán)境水樣中的腐殖酸等,。通常樣品中的強(qiáng)保存組分具有較高的分子量,，在此情況下，保存時(shí)間漂移的同時(shí)或其后會(huì)有反壓的增加,?？梢酝ㄟ^使用固相提取（SPE）等樣品前處理方法來往除樣品基質(zhì)的影響,。 

            避免色譜柱污染zui簡單的方法是防患于未然。相比之下,，找到題目的所在并設(shè)計(jì)有效的清洗步驟以往除污染物要困難的多,。廣州市駿凱電子科技有限公司通常使用在給定色譜條件下的強(qiáng)溶劑，但并非所有污染物都可以在活動(dòng)相中溶解,。如THF可往除反相色譜柱中的很多污染物,，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO經(jīng)常用于往除反相色譜柱中的蛋白,。 
使用保護(hù)柱是個(gè)非常有效的方法,。反沖色譜柱僅是不得已時(shí)采用的辦法。  

    四活動(dòng)相組成 

            活動(dòng)相組成的緩慢變化也是保存時(shí)間漂移的常見原因,。如活動(dòng)相中易揮發(fā)組分的揮發(fā)及循環(huán)使用活動(dòng)相等,。 

    五疏水坍塌 

             當(dāng)小孔徑、端基封口良好的反相填料色譜柱使用接近100%的水為活動(dòng)相時(shí),，有時(shí)會(huì)發(fā)生分離忽然喪失及被分析物質(zhì)保存明顯降低或*不保存的現(xiàn)象,，這就是疏水坍塌。此現(xiàn)象是由活動(dòng)相不浸潤固定相表面而致,。拯救的辦法實(shí)現(xiàn)用含大量有機(jī)組分的活動(dòng)相浸潤固定相，再用高水含量的活動(dòng)相進(jìn)行平衡,。由是色譜柱長期儲(chǔ)存也會(huì)發(fā)生此現(xiàn)象。使用內(nèi)嵌極性基團(tuán)的反相色譜柱（如Waters SymmetryShield RP色譜柱）或非端基封口的色譜柱（如Waters Resolve色譜柱）也可避免發(fā)生坍塌,。