詳細(xì)介紹
elisa原理 elisa實(shí)驗(yàn) DAO
產(chǎn)品名稱:人DAO ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名:人二胺氧化酶ELISA試劑盒
英文名稱:Human diamine oxidase,DAO ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測(cè)方法:ELISA酶聯(lián)免疫
待檢樣本:體液,,血清,,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,,尿液,,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
保存條件:2-8℃
抗體捕捉ELISA 本法主要用于檢測(cè)IgM抗體,。由于IgM抗體出現(xiàn)于感染早期,,所以 檢測(cè)出IgM,則可作為某種疾病的早期診斷,??贵w捕捉ELISA根據(jù)所用標(biāo)記方式不同可分為標(biāo)記抗原、標(biāo)記抗體,、標(biāo)記抗抗體捕捉ELISA等幾種,,其中以 標(biāo)記抗原捕捉ELISA比較有代表性,該方法的主要程序?yàn)椋?/span>
① 用抗u鏈(抗IgM重鏈)抗體包被→37℃ 60分鐘后置4℃過夜,,洗滌三次,、拋干
② 加待檢血清 → 37℃ 2小時(shí),洗滌三次,、拋干
③ 加酶標(biāo)抗原 → 37℃ 60分鐘,,洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,,加終止液
⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值,。
斑點(diǎn)ELISA(Dot-ELISA) 與常規(guī)的微量板ELISA比較,Dot-ELISA具有簡(jiǎn)便,、節(jié)省抗原等優(yōu)點(diǎn),,而且結(jié)果可長(zhǎng)期保存,;但其也有不足,主要是在結(jié)果判定上比較主觀,,特異性不夠高等,。該方法的主要操作程序?yàn)椋?/strong>
(1) 載體膜的預(yù)處理及抗原包被 取硝酸纖維素膜用蒸餾水浸泡后,稍加干燥進(jìn)行壓圈,。將陰性,、陽性抗原及被檢測(cè)抗原適度稀釋后加入圈中,置37℃使硝酸纖維素膜*干燥,。每張7cm×2.3cm的膜一般可點(diǎn)加40-53個(gè)樣品,,每個(gè)壓圈可加抗原液1-20μl。
(2) 封閉 將硝酸纖維素膜置于封閉液中,,37℃感作15-30分鐘,。封閉液多采用含有正常動(dòng)物血清、pH7.2或pH7.4的PBS,。
(3) 加被檢血清 可直接在抗原圈上加,,也可剪下抗原圈、置于微量板孔中,,再加入一定量適度稀釋的待檢血清,,37℃反應(yīng)一定時(shí)間,用洗滌液洗三次,,每次1-3分鐘,。洗滌液一般為一定濃度的PBS-Tween溶液。
(4) 加酶標(biāo)抗體,,37℃反應(yīng)一定時(shí)間后,,用洗滌液洗三次。
(5) 顯色 加入新鮮配制的底物液,,37℃反應(yīng)一定時(shí)間后,,去掉底物液,加蒸餾水洗滌終止反應(yīng),。
(6) 結(jié)果判定 以陽性,、陰險(xiǎn)血清作為對(duì)照,膜片*出現(xiàn)深棕紅色斑點(diǎn)者為陽性反應(yīng),,否則為陰性反應(yīng),。
elisa原理 elisa實(shí)驗(yàn) DAO