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產(chǎn)品簡介
公司主營產(chǎn)品：ELISA試劑盒,，Omega試劑盒，放免試劑盒,，ATCC細(xì)胞,，血清，抗體,，生物科研試劑等系列產(chǎn)品,，現(xiàn)貨供應(yīng)，物美價廉,。歡迎客戶“人PPIL1 ELISA試劑盒"詳細(xì)說明書,。
詳細(xì)介紹
elisa檢測 檢測試劑盒 PPIL1
產(chǎn)品名稱：人PPIL1 ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名：人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶（親環(huán)蛋白）樣1 ELISA試劑盒
英文名稱：Human peptidylprolyl isomerase（cyclophilin）-like 1,PPIL1 ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
檢測方法：ELISA酶聯(lián)免疫
待檢樣本：體液，血清,，血漿,，細(xì)胞培養(yǎng)上清液，尿液,，組織勻漿,心房水標(biāo)本等等,。
保存條件：2-8℃
ELISA方法的幾大類型總結(jié)
ELISA方法的幾大類型總結(jié)，根據(jù)ELISA所用的固相載體而區(qū)分為三大類型：一是采用聚苯乙烯微量板為載體的ELISA,，即我們通常所指的ELISA（微量板ELISA）,；另一類是用硝酸纖維膜為載體的ELISA,稱為斑點ELISA（Dot-ELISA）;再一類是采用疏水性聚脂布作為載體的ELISA，稱為布ELISA（C－ELISA）,。在微量板ELISA中,，又根據(jù)其性質(zhì)不同分為間接ELISA,、雙抗體夾心ELISA、雙夾心ELISA,、競爭ELISA,、阻斷ELISA及抗體捕捉ELISA。
1.間接ELISA 本法主要用于檢測抗體,。以鴨病毒性肝炎（DVH）抗體的ELISA為例,，間接ELISA的操作程序如下。
（1） 材料
① 包被液,、洗滌液,、保溫液、底物液,、終止液；
② DVH包被抗原,、酶標(biāo)抗抗體,、陰性及陽性DVH參考血清；待檢鴨血清,；
③ ELISA檢測儀,、加樣器、聚苯乙烯微量板,。
（2） 方法步驟
① 加抗原包被 → 4℃過夜,，洗滌三次、拋干
② 加待檢血清 → 37℃ 2小時,，洗滌三次,、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 2小時，洗滌三次,、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘,，加終止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值，并計算出P/N比值,。
（3） 結(jié)果判定 已知陽性血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1,，而且已知陽性血清的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下,，如果待檢血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1,，而且待檢血清的OD值≥0.4，則判為陽性,，否則判為陰性,。
2.雙抗體夾心ELISA 本法主要用于檢測大分子抗原。現(xiàn)以檢測雞傳染性法氏囊病病毒（IBDV）的雙夾心抗體ELISA為例介紹本法的操作程序,。
① 加抗體包被 → 4℃過夜,，洗滌三次,、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次,、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,，洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,，加終止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值,。
3.雙夾心ELISA 此法與雙抗體夾心ELISA的主要區(qū)別在于：它是采用酶標(biāo)抗抗體檢查多種大分子抗原，它不僅不必標(biāo)記每一種抗體,，還可提高試驗的敏感性,。此法的基本程序為：
① 加抗體（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次,、拋干
② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘,，洗滌三次、拋干
③ 加用非同種動物生產(chǎn)的特異性抗體（Ab-2）→ 37℃ 60分鐘,，洗滌三次,、拋干
④ 加入酶標(biāo)抗Ab-2抗體（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次,、拋干
⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,，加終止液
⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。
4.競爭ELISA 此法主要用于測定小分子抗原及半抗原,，其原理類似于放射免疫測定,。其基本程序為：
① 抗體包被 → 4℃過夜，洗滌三次,、拋干
② 加入待檢抗原及一定量的酶標(biāo)抗原（對照孔僅加酶標(biāo)抗原）→ 37℃ 60分鐘,，洗滌三次、拋干
③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,，加終止液
④ 用ELISA檢測儀測定OD值,。
被結(jié)合的酶標(biāo)抗原的量由酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來確定，如果待檢溶液中抗原越多,，被結(jié)合的標(biāo)記抗原的量就越少,，有色產(chǎn)物就減少，這樣根據(jù)有色產(chǎn)物的變化就可求出未知抗原的量,。此法的優(yōu)點在于快速,、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測,；其主要不足在于每種抗原都要進(jìn)行酶標(biāo)記,，而且因為抗原的結(jié)構(gòu)不同，還需應(yīng)用不同的結(jié)合方法。此外,，試驗中應(yīng)用酶標(biāo)抗原的量較多,。
5.阻斷ELISA 本法主要用于檢測型特異性抗體。該方法現(xiàn)已成為豬傳染性胃腸炎（TGE）,、豬偽狂犬?。≒R）及豬胸膜肺炎（AP）的主要檢測方法。下面以AP2型抗體的阻斷ELISA檢測法為例介紹其操作程序：
① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜,，洗滌三次,、拋干
② 用200μl阻斷緩沖液進(jìn)行封閉 → 37℃ 60分鐘，洗滌三次,、拋干
③ 加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl → 37℃ 60分鐘,，洗滌三次、拋干
④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分鐘,，洗滌三次,、拋干
⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘，洗滌三次,、拋干
⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘,，加終止液
⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。
本試驗同時設(shè)標(biāo)準(zhǔn)陰,、陽性血清對照、兔抗AP2型陽性對照,、空白對照,。
6.抗體捕捉ELISA 本法主要用于檢測IgM抗體。由于IgM抗體出現(xiàn)于感染早期,，所以檢測出IgM,，則可作為某種疾病的早期診斷?？贵w捕捉ELISA根據(jù)所用標(biāo)記方式不同可分為標(biāo)記抗原,、標(biāo)記抗體、標(biāo)記抗抗體捕捉ELISA等幾種,，其中以標(biāo)記抗原捕捉ELISA比較有代表性,，該方法的主要程序為：
① 用抗u鏈（抗IgM重鏈）抗體包被→37℃ 60分鐘后置4℃過夜，洗滌三次,、拋干
② 加待檢血清 → 37℃ 2小時,，洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗原 → 37℃ 60分鐘,，洗滌三次,、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。
7.斑點ELISA（Dot-ELISA） 與常規(guī)的微量板ELISA比較,，Dot-ELISA具有簡便,、節(jié)省抗原等優(yōu)點，而且結(jié)果可長期保存,；但其也有不足,，主要是在結(jié)果判定上比較主觀，特異性不夠高等,。該方法的主要操作程序為：
（1） 載體膜的預(yù)處理及抗原包被 取硝酸纖維素膜用蒸餾水浸泡后,，稍加干燥進(jìn)行壓圈。將陰性,、陽性抗原及被檢測抗原適度稀釋后加入圈中,，置37℃使硝酸纖維素膜*干燥。每張7cm×2.3cm的膜一般可點加40－53個樣品,，每個壓圈可加抗原液1－20μl,。
（2） 封閉 將硝酸纖維素膜置于封閉液中，37℃感作15－30分鐘,。封閉液多采用含有正常動物血清,、pH7.2或pH7.4的PBS。
（3） 加被檢血清 可直接在抗原圈上加,，也可剪下抗原圈,、置于微量板孔中，再加入一定量適度稀釋的待檢血清,，37℃反應(yīng)一定時間,，用洗滌液洗三次，每次1－3分鐘,。洗滌液一般為一定濃度的PBS-Tween溶液,。
（4） 加酶標(biāo)抗體，37℃反應(yīng)一定時間后,，用洗滌液洗三次,。
（5） 顯色 加入新鮮配制的底物液，37℃反應(yīng)一定時間后,，去掉底物液,，加蒸餾水洗滌終止反應(yīng)。
（6） 結(jié)果判定 以陽性,、陰險血清作為對照,，膜片*出現(xiàn)深棕紅色斑點者為陽性反應(yīng)，否則為陰性反應(yīng),。
8.布ELISA（C－ELISA） C－ELISA（Cloth-ELISA）是加拿大學(xué)者Blais, B. W.等于1989年建立的一種新型免疫檢測技術(shù),。該方法是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即滌綸布為固相載體，這種大孔徑的的疏水布具有吸附樣品量大，可為免疫反應(yīng)提供較大的表面積,，提高反應(yīng)的敏感性,，且容易洗滌，不需特殊儀器等優(yōu)點,。其基本原理與Dot-ELISA類似,，只是載體不同。以對布氏桿菌抗原的檢測為例,，C－ELISA的主要程序為：
（1） 首先把抗布氏桿菌的血清包被（吸附）在聚脂布上,，并經(jīng)洗滌及封閉；
（2） 加被檢樣品并于室溫下感作30分鐘,，然后洗5次,；
（3） 加酶標(biāo)記的抗布氏桿菌抗體，于室溫下感作30分鐘,，然后洗滌5次,；
（4） 加入底物液顯色；
（5） 測定OD值,，ELISA方法的幾大類型總結(jié),。
elisa檢測 檢測試劑盒 PPIL1