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人DPYSL2 ELISA試劑盒
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  • 人DPYSL2 ELISA試劑盒

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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 美國
更新時間: 2025-03-27 21:00:08
期: 2025年3月27日--2025年9月27日
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產(chǎn)品簡介

公司主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,Omega試劑盒,,放免試劑盒,,ATCC細(xì)胞,,血清,抗體,,生物科研試劑等系列產(chǎn)品,,現(xiàn)貨供應(yīng),物美價廉,。歡迎客戶“人DPYSL2 ELISA試劑盒"詳細(xì)說明書,。

詳細(xì)介紹

DPYSL2 ,elisa實驗,人二氫嘧啶酶

產(chǎn)品名稱:人DPYSL2 ELISA試劑盒

產(chǎn)品別名:人二氫嘧啶酶樣2 ELISA試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測方法:ELISA酶聯(lián)免疫
待檢樣本:體液,血清,,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,,尿液,,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
保存條件:2-8℃

Elisa間接法,、競爭法,、捕獲法

Elisa間接法、競爭法,、捕獲法,,間接法測抗體
間接法是檢測抗體zui常用的方法,其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體,,故稱為間接法,。操作步驟如下:
(1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì),。
(2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結(jié)合,,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,,固相載體上只留下特異性抗體,。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合,在洗滌過程中被洗去,。
(3)加酶標(biāo)抗抗體:與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合,,從而使該抗體問接地標(biāo)記上酶。洗滌后,,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量,。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體,。
(4)加底物顯色:顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量,。
本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標(biāo)抗抗體檢測各種與抗原相應(yīng)的抗體,。
Elisa間接法,、競爭法,、捕獲法,競爭法
競爭法可用于測定抗原,,也可用于測定抗體,。以測定抗原為例,受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,,因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比,。操作步驟如下:
(1)將特異抗體與固相載體連接,形成固相抗體,。洗滌,。
(2)待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,使之與固相抗體反應(yīng),。如受檢標(biāo)本中無抗原,,則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原,,則與酶標(biāo)抗原以同樣的機會與固相抗體結(jié)合,,競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機會,使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少,。參考管中只加酶標(biāo)抗原,,保溫后,酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)zui充分的量,。洗滌,。
(3)加底物顯色:參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多,故顏色zui深,。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,,代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測管顏色越淡,,表示標(biāo)本中抗原含量越多,。
Elisa間接法、競爭法,、捕獲法,,捕獲法測IgM抗體
血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在,后者會干擾IgM抗體的測定,。因此測定IgM抗體多用捕獲法,,先將所有血清IgM(包括特異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測定特異性IgM,。操作步驟如下:
(1)將抗人IgM抗體連接在固相載體上,,形成固相抗人IgM。洗滌。
(2)加入稀釋的血清標(biāo)本:保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲,。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分,。
(3)加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌,。
(4)加入針對特異性的酶標(biāo)抗體:使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合,。洗滌。
(5)加底物顯色:如有顏色顯示,,則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在,,是為陽性反應(yīng)。
Elisa間接法,、競爭法,、捕獲法,應(yīng)用親和素和生物素的ELISA
親和素是一種糖蛋白,,可由蛋清中提取,。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,,可以和4個生物素分子親密結(jié)合。現(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素,。生物素又稱維生素H,,分子量244.31,存在于蛋黃中,。用化學(xué)方法制成的衍生物,,生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物,。親和素與生物素的結(jié)合,,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強,,親和力大,,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結(jié)合位置,,可以連接更多的生物素化的分子,,形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELISA偶聯(lián)起來,,就可大大提高ELISA的敏感度,。
親和素-生物素系統(tǒng)在ELISA中的應(yīng)用有多種形式,可用于間接包被,,亦可用于終反應(yīng)放大,。可以在固相上先預(yù)包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結(jié)合,,通過親和素-生物素反應(yīng)而使生物素化的抗體或抗在相化,。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結(jié)合點充分暴露,。另外,,在常規(guī)ELISA中的酶標(biāo)抗體也可用生物素化的抗體替代,然后連接親和素-酶結(jié)合物,,以放大反應(yīng)信號,,Elisa間接法、競爭法,、捕獲法,。

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