詳細(xì)介紹
cAMP,elisa原理,人環(huán)磷酸腺苷
產(chǎn)品別名:人環(huán)磷酸腺苷ELISA試劑盒
英文名稱:Human cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測(cè)方法:ELISA酶聯(lián)免疫
產(chǎn)品用途: 科研ELISA檢測(cè)試劑盒
檢測(cè)原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
Elisa實(shí)驗(yàn)如何排除標(biāo)本的干擾?
Elisa實(shí)驗(yàn)如何排除標(biāo)本的干擾,標(biāo)本溶血,、標(biāo)本被細(xì)菌污染,、標(biāo)本貯存時(shí)間過長(zhǎng)和標(biāo)本凝固不全等,具體如下:
1.標(biāo)本溶血 要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血,。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),,其有類似過氧化物的活性,因此,,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中,,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色,。
2.標(biāo)本被細(xì)菌污染 樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),,其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用,;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的p—半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
3.標(biāo)本貯存時(shí)間過長(zhǎng) 標(biāo)本在2~8~C下保存時(shí)間過長(zhǎng),,IgG可聚合成多聚體,,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽(yáng)性。血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,,則可以在2~8~C下保存1周,,如為有菌操作,則建議冷凍保存,。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存,,應(yīng)在一70~C以下。
4.標(biāo)本凝固不全 血液采集后,,如收集管中無促凝劑和抗凝劑,,則血液通常在半小時(shí)后開始凝固,18~24h*凝固,。日常檢驗(yàn)中,,常在血液還未開始凝固時(shí)即離心分離血清,此時(shí)因血液沒有*凝固,,離出的“血清”并非為*的血清,,其中仍殘留部分纖維蛋白原,如將其加入微孔中,,在ELISA測(cè)定過程中仍可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,,易造成假陽(yáng)性結(jié)果。因此,,血液標(biāo)本采集后,,應(yīng)使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?br />5.冷凍保存標(biāo)本避免反復(fù)凍融 冷凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融,。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,,從而引起假陰性結(jié)果。此外,,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可,。此外,,標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的渾濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)
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