詳細介紹
LDH,elisa檢測 ,乳酸脫氫酶
產(chǎn)品別名:人乳酸脫氫酶ELISA試劑盒
英文名稱:Human Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測方法:ELISA酶聯(lián)免疫
產(chǎn)品用途: 科研ELISA檢測試劑盒
檢測原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
ELISA試劑盒的包被條件與封閉
ELISA試劑盒的包被條件與封閉,包被用抗原或抗體的濃度,,包被的溫度和時間,,包被液的pH等應根據(jù)試驗的特點和材料的性質(zhì)而選定??贵w和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,,在4-8℃冰箱中放置過夜,,37℃中保溫2小時被認為具有同等的包被效果。包被的zui適當濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定,。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml,。
ELISA試劑盒的包被條件與封閉,封閉(blocking)是繼包被之后用高濃度的無關蛋白質(zhì)溶液再包被的過程,??乖蚩贵w包被時所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙,,封閉就是讓大量不相關的蛋白質(zhì)充填這些空隙,,從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。封閉的手續(xù)與包被相類似,。zui常用的封閉劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,,也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封閉劑的。脫脂奶粉也是一種良好的封閉劑,,其zui大的特點是價廉,,可以高濃度使用(5%)。高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當作封閉劑使用,,但由于奶粉的成份復雜,,而且封閉后的載體不易長期保存,因此在試劑盒的制備中較少應用,。
ELISA試劑盒的包被條件與封閉,,封閉是否必要,取決于ELISA的模式及具體的實驗條件,。并非所有的ELISA固相均需封閉,,封閉不當反而會使陰性本底增高。一般說來,,雙抗體夾心法,,只要酶標記物是高活性的,操作時洗滌*,,不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果,。特別是用單抗腹水直接包被時,因其中大量非抗體蛋白在包被時同樣也吸附在固相表面,,業(yè)已起到了類似封閉劑的作用,。但在間接法測定中,封閉一般是不可少的,。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或錫袋中,,在低溫可保存數(shù)月。
LDH,elisa檢測 ,乳酸脫氫酶