詳細介紹
檢測試劑盒 elisa原理 OPG
產(chǎn)品別名:人骨保護素ELISA試劑盒
英文名稱:Human Osteoprotegerin,OPG ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測方法:ELISA酶聯(lián)免疫
產(chǎn)品用途: 科研ELISA檢測試劑盒
檢測原理: 采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
人類細胞因子的檢測
一、人類干擾素的檢測
人類干擾素(humaninterferon,,HuIFN)有α,、β和γ三種,其中HuIFN-γ由T細胞產(chǎn)生,,三種HuIFN都有抗病毒作用,,因此可利用病毒的各種生物學特性建立相應的檢測方法,如血凝素抑制試驗,,是以人肺癌細胞株A549作為小鼠腦脊髓心肌炎病毒的敏感細胞,,將此病毒接種于A549的單層細胞培養(yǎng)中,,可產(chǎn)生使人“O”型紅細胞凝集的血凝素。若在此培養(yǎng)中加入可能含有IFN的血清標本,,由于IFN能抑制病毒在細胞中的生長,,而使血凝素產(chǎn)生降低,借助“O”型紅細胞的凝集反應判斷IFN的活性,。本方法既可定性又可定量,。
二、腫瘤壞死因子(TNF)的檢測
TNF的主要生物學功能是對某些腫瘤細胞具有細胞毒作用,。常用于TNF檢測的敏感細胞系為L929細胞,,基本方法如下:收集處于對數(shù)生長期的L929細胞,經(jīng)洗滌,、計數(shù)后調(diào)節(jié)到適宜濃度,,加入至96細胞培養(yǎng)板中,37℃,、5%CO2培養(yǎng)16~24小時,,換液后在各孔內(nèi)加入不同稀釋濃度的待檢樣本,再加入適量的放線菌素D和培養(yǎng)液,,繼續(xù)培養(yǎng)16小時左右,,加入100μl MTT,培養(yǎng)6小時后,,輕輕吸去上清,,加入酸化異丙醇,再在570nm波長下測定光密度,,其光密度值與TNF細胞毒功能成反比,,據(jù)此推測樣本中TNF含量。TNF的檢測在某些炎癥,、自身免疫性疾病,、移植排斥反應、重癥肝炎等疾病的診斷,、監(jiān)測中有一定意義,。
三、白細胞介素-1(IL-1)的檢測
取肝素抗凝血經(jīng)分層液(比重1.077)離心分離單個核細胞,,配成一定的濃度加入塑料培養(yǎng)板孔中溫育1~3小時,,洗去未粘附細胞,然后每孔加入含一定濃度LPS的細胞培養(yǎng)液,,繼續(xù)溫育一定時間,,收集上清液檢測IL-1活性。
IL-1活性zui常用的檢測法是小鼠胸腺細胞增殖反應,。該法原理:IL-1可輔助ConA或PHA等刺激小鼠胸腺細胞的增殖,,增殖細胞的DNA合成增加,。在細胞培養(yǎng)結(jié)束前6小時加入3H-TdR,待培養(yǎng)結(jié)束時收集細胞,,檢測放射性強度,,即可判斷IL-1活性。由于IL-1能促進小鼠T細胞傳代株LBRM-33和EL-4分泌IL-2,,當含IL-1待檢樣品加入上述細胞培養(yǎng)液,,則培養(yǎng)上清IL-2增加,再用IL-2依賴細胞株測定分泌IL-2的多少,,可間接推測樣品中IL-1含量,。其他IL的生物學檢測方法大致相同,增殖反應細胞常采用IL的依賴株,。
檢測試劑盒 elisa原理 OPG