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產品簡介
上海恒遠公司長期專業(yè)經營“人ON ELISA試劑盒",，現貨供應,，*，質量保證。中英文雙版說明書,，提供實驗代測服務,。需要產品以及其它詳細信息請直接來電索取。
詳細介紹
elisa kit elisa檢測 ON
人ON ELISA試劑盒
產品別名：人骨粘連蛋白ELISA試劑盒
英文名稱：Human osteonectin,ON ELISA KIT
產品規(guī)格：48T/96T
保存條件：2-8℃
主要作用：研究使用
ELISA原理
ELISA是以免疫學反應為基礎,，將抗原,、牽9體的特異 性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原,、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,，每加入一 種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物,，從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性,。在實際應用中，通過不同的設計,，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢 測抗體的間接法（圖a）,、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及 ELISA間接法。
ELISA注意事項
1. 正式試驗時,，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性,。有時本底較高,，說明有非特異性反應，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的,，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體,，如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40 孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被,，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否 良好,。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度,，時間及其蛋白量也 有一定影響,一般多采用4℃18～24小時,。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后,，在 其它試驗條件相同時,，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度,。對于多數蛋白質來說通常為1～10μg／ml,。
（3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物,、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全,、有明顯地顯色反應,，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用,，應注意 防護,。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應,。通常底物 作用時間,，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,，尤其是H2O2在臨用前加入,。
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