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產(chǎn)品簡介
上海恒遠公司長期專業(yè)經(jīng)營“人ET ELISA試劑盒",，現(xiàn)貨供應(yīng)，*,，質(zhì)量保證,。中英文雙版說明書，提供實驗代測服務(wù),。需要產(chǎn)品以及其它詳細信息請直接來電索取,。
詳細介紹
elisa實驗 elisa kit ET
人ET ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名：人內(nèi)毒素ELISA試劑盒
英文名稱：Human endotoxin,ET ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
保存條件：2-8℃
主要作用：研究使用
ELISA原理
ELISA是以免疫學反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原,、牽9體 的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù),。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,，每 加入一種試劑孵育后,，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。在實際應(yīng)用中,，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種,。即: 用于檢測抗體的間接法（圖a）,、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心 法及ELISA間接法。
ELISA操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml,。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃過夜。次日,，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘,。（簡稱洗滌,，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,，置37℃孵育1小時,。然后洗滌。（同時做空白孔,，陰性對照孔及陽性對照孔）,。
3. 加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,。37℃孵育0.5～1小時,，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘,。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強,，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-” 號表示,。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰 性對照OD值的2.1倍,，即為陽性,。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至 1～10μg／ml，每孔加0.1ml,，4℃過夜,。次日洗滌3次,。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小 時,洗滌。（同時做空白,、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘,，洗滌,zui后一遍用 DDW洗滌,。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5,、6,。