詳細介紹
elisa原理 檢測試劑盒 GLUT1
產(chǎn)品別名:人葡萄糖轉運蛋白1 ELISA試劑盒
英文名稱:Human Glucose transporter 1,GLUT1 ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
經(jīng)營種類:進口分裝和原裝
主要作用:科研
競爭法測抗原
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,,可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的 酶標抗原競爭與固相抗體結合,。標本中抗原量含量愈多,,結合在固相上的酶標抗原愈少,zui后的顯色也愈淺,。小分子激素,、藥物等ELISA測定多用此法。
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9,,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml,,在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜,。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,,每次3分鐘,。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,。然后洗滌,。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔),。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小時,,洗滌,。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml,。
6. 結果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,,陰性反應為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”,、“-”號表示,。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,,即為陽性,。
elisa原理 檢測試劑盒 GLUT1