詳細介紹
elisa原理 elisa檢測 BSP
產(chǎn)品別名:人骨涎蛋白ELISA試劑盒
英文名稱:Human bone sialoprotein,BSP ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
經(jīng)營種類:進口分裝和原裝
主要作用:科研
雙抗原夾心法測抗體
反應模式與雙抗體夾心法類似,。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物,,以檢測相應的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體,。 此法中受檢標本不需稀釋,,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法,。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法,。本法關(guān)鍵在于酶標抗原的制備,應根據(jù)抗原 結(jié)構(gòu)的不同,,尋找合適的標記方法,。
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,,在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,,4℃過夜,。次日,,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,,每次3分鐘,。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,。然后洗滌,。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔),。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小時,,洗滌,。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘,。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml,。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強,,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,,即為陽性,。
elisa原理 elisa檢測 BSP