詳細(xì)介紹
CTX ,elisa原理,人環(huán)磷酰胺
產(chǎn)品別名:人環(huán)磷酰胺ELISA試劑盒
英文名稱:Human Cyclophosphamide,CTX ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
經(jīng)營種類:進(jìn)口分裝和原裝,、國產(chǎn)
主要作用:科研
ELISA的類型
ELISA可用于測定抗原,,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個(gè)必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,,即"免疫吸附劑" (immunosorbent),;(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate),;(3)酶反應(yīng)的底物,。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以 及檢測的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法,。
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9,,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,,4℃過夜,。次日,棄去孔內(nèi)溶液,,用洗滌緩沖液洗3次,,每次3分鐘。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,,置37℃孵育1小時(shí),。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔),。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小時(shí),,洗滌,。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘,。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號(hào)表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,,即為陽性。
CTX ,elisa原理,人環(huán)磷酰胺