詳細(xì)介紹
sCKR,人可溶性細(xì)胞因子受體,酶免試劑盒
產(chǎn)品名稱:人sCKR ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名:人可溶性細(xì)胞因子受體ELISA試劑盒
英文名稱:Human soluble cytokine receptor,sCKR ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
ELISA關(guān)鍵步驟為以下幾點(diǎn):
1、盡量用八道或者十二道移液器加樣,。對于相同的試劑,,經(jīng)如二抗,酶,,顯色液,終止液等,。
2,、自己的樣品,因?yàn)槊恳豢椎臉悠凡灰粯?,用排槍加有些麻煩,,如果一次的樣品比較少,而自己加樣又比較快,,可以一個(gè)孔一個(gè)孔的加,,但如果想一次把96或者48T的做完,可以先擺好一些PCR管或者準(zhǔn)備一個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,。將自己的樣品先加到PCR管或者培養(yǎng)板中(此板間距與酶板板相同),。記得加一定的余量,如一次加樣是50ul,,可以先加70ul,。加完后再用排槍加樣,這樣可以縮短加樣時(shí)間,,減小每個(gè)孔間的時(shí)間誤差,。
3、如果有多余的孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔可以做復(fù)孔,,在自己的樣品前加一次標(biāo)準(zhǔn)品,加完樣品后再加一次標(biāo)準(zhǔn)品,。如果孔不夠,,那么可以將標(biāo)準(zhǔn)品放在樣品中間加。
用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,,每孔加0.1ml,,4℃過夜,。次日洗滌3次。
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加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌,。(同時(shí)做空白,、陰性及陽性孔對照)
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于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,, 37℃孵育30-60分鐘,,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
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加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘,。
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終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
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結(jié)果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”、“-”號表示,。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性,。
sCKR,人可溶性細(xì)胞因子受體,酶免試劑盒