詳細(xì)介紹
槐凝集素ELISA試劑盒
保存條件:2-8℃
英文名稱:Sophora japonica agglutinin,SJA ELISA KIT
槐凝集素ELISA試劑盒 標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性
Elisa實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備
1仔細(xì)閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量,、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管,、吸頭,、移液器、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
8選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì),;若選擇兩個(gè)單抗,必須識(shí)別不同表位的抗體,;從同一家公司選擇抗體對(duì),。
9ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí),,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作,。
10標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,注意每批的細(xì)節(jié),。在使用細(xì)胞因子前,,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),,將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
11一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml,??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒,、第三類試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
12為了優(yōu)化靈敏度,,建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性,。
14當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí),如血清,,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.
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