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大鼠可溶性Toll樣受體2 ELISA試劑盒96T/48T 均備現(xiàn)貨,!
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是國內(nèi)主要供應(yīng)商之一,公司代理美國原裝R&D RB BD等不同品牌價(jià)格檔次的ELISA試劑盒,。數(shù)萬種抗體產(chǎn)品等, 品種多,,質(zhì)量好,靈敏度高,,價(jià)格實(shí)惠,,并且還提供免費(fèi)代檢測服務(wù)。
“大鼠可溶性Toll樣受體2 ELISA試劑盒”操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,,混勻時(shí)盡量避免起泡,。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘,。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,甩干,。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,,37℃,60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,,甩干,。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,,后3-4孔梯度不明顯,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測,。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,,以便試劑集中到管底,。
2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4,。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā),,試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存,。標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用,。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液,。
5. 建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定,,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
“”可檢測樣本:血液標(biāo)本,,組織液標(biāo)本,,尿液標(biāo)本,糞便標(biāo)本,,腦脊液標(biāo)本,,胸腹水標(biāo)本等(具體詳細(xì)情況請咨詢)。