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    您知道嗎？在ELISA實驗操作中,，洗滌是一大重點(diǎn)步驟,。這*程主要作用是可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號，從而增加分析的信噪比,。每一步之間的洗滌確保只有特異的結(jié)合事件被保留，在zui后一步產(chǎn)生信號,。但是,，不充分的洗滌會導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來不理想的結(jié)果,。那么在ELISA洗滌步驟中需要怎樣正確操作呢,？需要洗滌幾次？
    據(jù)上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司技術(shù)專員介紹：ELISA通常在96孔板中開展,，其上包被了結(jié)合抗原或抗體,。在封閉步驟后，包被后的平板首先與一抗或抗原孵育,。隨后通過一些洗滌步驟去除未結(jié)合(低親和力)的抗原-抗體復(fù)合物,。接著，平板與二抗孵育,。這種帶有酶的抗體與高親和力的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。之后,，又是一輪洗滌,。zui后是添加底物并檢測信號。
    洗滌次數(shù)越多,，背景越低,。然而,，太多次的洗滌會降低信號強(qiáng)度,，使其難以測定,。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過,，ELISA板的商會對洗滌次數(shù)提出建議,。一般而言,，商包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少。對于用戶包被的ELISA板,，必須優(yōu)化洗滌次數(shù),。
    控制洗滌量和洗滌次數(shù)的另一種方法是加入過量的洗滌液。一般來說,，96孔板的每個孔能容納330至460 μl,。不過，有些自動化洗板機(jī)可設(shè)置程序,，分配遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出這個量的洗滌液，比如1ml,。它是如何做到的呢,？其實很簡單,，就是在分液的同時打開吸液功能,。換句話說，隨著分液器分配更多的液體,，抽吸器也將液體吸出,。這種技術(shù)能增加洗滌量，但不會溢出到其他孔中,。
    相信在您的悉心優(yōu)化下，很快就能做出漂亮的ELISA實驗結(jié)果,。以上我公司對ELISA洗滌次數(shù)做出的心得點(diǎn)評,，如需了解相關(guān)技術(shù)問題，歡迎您隨時我司業(yè)務(wù)員,。