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                                                               脂肪酶活性測定方法

　1、粗酶液的制備 　　用電子天平分別稱取粗脂肪酶0.010 g,、0.020 g 和0.030 g,， 用蒸餾水溶解并定容至100 mL， 配成濃度分別為0.01%,、0.02% 和0.03%的粗酶液,。 　

　2、實驗設(shè)計 　　本實驗以10 mL色拉油為底物,，以酶用量,、水解溫度、反應(yīng)時間為因素,，通過酸價的測定選定其水解的*條件,。 　　

    3、酸價的測定 　　酸價是指中和1 mol游離脂肪酸所需NaOH的毫克數(shù),， 它用于衡量油脂的水解程度,。實驗中用酸堿滴定法測定水解液的酸價， 參照文獻[ 3,， 4 ]中所使用的方法,， 向所得的水解液滴加1 mL 95%的乙醇溶液， 搖勻,， 終止反應(yīng),， 并加入2滴酚酞指示劑， 迅速用0.05 mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微紅色,， 在30 s內(nèi)不消失為終點,， 記錄消耗的NaOH溶液毫升數(shù)（V ） 。用同樣的方法測定空白值,， 每個試驗重復(fù)兩次,， 以平均值作為測定結(jié)果。 　　酸價按下式計算： 　　X = C （V - V0 ） ×40 /M 　　式中: X —油脂酸價（mgNaOH /g油） 　　C—NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/L） 　　M —試樣的質(zhì)量（ g） 　　40—NaOH的mmol質(zhì)量（mg/mmol） 　　

     4 ,、粗脂肪酶活力的測定 　　在*水解條件下,， 分別測得粗脂肪酶和標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶水解液的酸價X1、X2 ,， 根據(jù)公式U1 /U= X1 / X2求得粗脂肪酶的活力,， 其中U1為粗脂肪酶活力， U為標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶活力,。 　　

     5,、標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶液的配制 　　根據(jù)實驗*條件， 配制標(biāo)準(zhǔn)脂肪酶液,。一篇相關(guān)文獻 粗脂肪酶活力的測定方法的研究.pdf 　　答：實驗設(shè)計,，本實驗以10 mL色拉油為底物，以酶用量、水解溫度,、反應(yīng)時間為因素,，通過酸價的測定選定其水解的*條件。用色拉油作底物不太妥,，一般是用橄欖油,，化學(xué)純的。