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小鼠腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA檢測(cè)試劑盒
閱讀：407 發(fā)布時(shí)間：2015-3-6| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 6.5KB |
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| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 407次 |
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小鼠（Mouse）腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA檢測(cè)試劑盒
本試劑僅供研究使用
試驗(yàn)原理：
TNF-β試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知TNF-β濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將TNF-β和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,，加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A,、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中TNF-β的濃度呈比例關(guān)系。
試劑盒內(nèi)容及其配制：
試劑盒成份 | 96孔配置 | 48孔配置 |
96/48人份酶標(biāo)板 | 1塊板（96T） | 半塊板（48T） |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 |
標(biāo)準(zhǔn)品：500pg/ml | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） |
空白對(duì)照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 | 1瓶（8.0ml） | 1瓶（4.0ml） |
生物素標(biāo)記的抗TNF-β抗體 | 1瓶（8.0ml） | 1瓶（4.0ml） |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶（12ml） | 1瓶（5ml） |
洗滌緩沖液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（10ml） |
底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
終止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） |
自備材料：
1. 蒸餾水,。
2. 加樣器：5ul,、10ul、50ul,、100ul、200ul,、500ul,、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等,。
4.
樣品收集,、處理及保存方法：
- 血清……操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原
和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血紅
細(xì)胞迅速小心地分離。
2,、 血漿……EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘，取上清液,。
5,、 保存……如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
操作注意事項(xiàng)：
● 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。
● 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
● 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
● 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器。
● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
● 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
● 加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
● 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。