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技術(shù)文章

丙二醛“MDA”指標(biāo)含量檢測(cè)操作方法

閱讀:3904          發(fā)布時(shí)間:2016-4-15

測(cè)試所需儀器設(shè)備:可見(jiàn)光分光光度計(jì),可調(diào)到95℃左右的恒溫水浴箱(或者鋁鍋內(nèi)放幾個(gè)去掉蓋子的易拉罐,,將罐壁及底部穿數(shù)十個(gè)孔,,以便水的進(jìn)入,用來(lái)代替水浴箱),。離心機(jī),。

一、旋渦混勻器混勻,,試管口用保鮮薄膜扎緊,,用針頭刺一小孔,95℃水?。ɑ蛴缅侀_(kāi)蓋煮沸40分鐘),,取出后流水冷卻,然后3500~4000轉(zhuǎn)/分,,離心10分鐘,,取上清液,532nm處,,1cm光徑,,蒸餾水調(diào)零,測(cè)各管吸光度值,。

二,、以a表示所取的樣品量,標(biāo)準(zhǔn)品量,,無(wú)水乙醇的量,、試劑一的量,四者均相等,,例如樣品取0.1mL,,則標(biāo)準(zhǔn)品、無(wú)水乙醇及試劑一也取0.1mL,,若樣品取0.2mL,,則標(biāo)準(zhǔn)品、無(wú)水乙醇及試劑一也取0.2mL,。因吸光度與加樣量呈正比曲線,,因而結(jié)果不受影響,。

三、一般情況下,,標(biāo)準(zhǔn)管,、標(biāo)準(zhǔn)空白及測(cè)定空白管每批只需做1~2只,若測(cè)定管中蛋白量不是太高,,則測(cè)定空白管可以不測(cè),用標(biāo)準(zhǔn)空白管來(lái)代替測(cè)定空白管,。

四,、吸取上清比色時(shí)了好用移液器吸取上清加入比色皿中,盡量避免傾倒,,以免沉淀進(jìn)入比色皿,,影響吸光度。

注1.用此方法,,所測(cè)各管吸光度值比規(guī)范操作方法要高,,但不影響zui終結(jié)果。
注2.5%組織勻漿a*取0.1~0.2mL進(jìn)行檢測(cè)較好,。
注3.若發(fā)現(xiàn)檢測(cè)樣本吸光主葢低,,可以將水浴時(shí)間40分鐘延長(zhǎng)至80分鐘,但您的同一課題中MDA的檢測(cè)都必須延長(zhǎng)至80分鐘,,以免造成批間差異,。
注4.此方法標(biāo)準(zhǔn)管參考吸光度:當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品取樣量為0.1mL時(shí),則標(biāo)準(zhǔn)管吸光度減去標(biāo)準(zhǔn)空白管吸光度為0.103~0.112,。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品取樣量為0.2mL時(shí),,則標(biāo)準(zhǔn)管吸光度減去標(biāo)準(zhǔn)空白管吸光度為0.206~0.224。

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