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ELISA試劑盒檢測的影響因素有哪些
閱讀：1324 發(fā)布時(shí)間：2015-8-3ELISA方法被廣泛用于各種抗原和抗體測定,。但ELISA測定中影響因素較多,，而且其操作中有一定的技術(shù)要求,，在臨床檢驗(yàn)中如果處理不當(dāng),，會(huì)出現(xiàn)一些錯(cuò)誤結(jié)果（即假陽性或假陰性結(jié)果）。引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：（1）標(biāo)本因素,；（2）操作因素,；（3）試劑因素；本文主要就操作因素對ELISA測定的影響做如下討論：
操作因素
1,、溫育的影響
溫育是影響ELISA測定結(jié)果的關(guān)鍵因素,。溫育時(shí)間不夠，弱陽性標(biāo)本檢測不出,；溫育溫度不夠,，弱陽性標(biāo)本也難以檢出。
2,、洗板的影響
洗板對ELISA測定來說也是關(guān)鍵步驟,。洗板分手工洗板和機(jī)器洗板，一般認(rèn)為機(jī)器洗板較手工洗板效果要好,，關(guān)鍵是洗板次數(shù)的選擇,。洗板次數(shù)較少，造成殘留,，可引起假陽性結(jié)果,；洗板次數(shù)過多，可造成抗原抗體結(jié)合物洗脫,，造成假陰性結(jié)果,。
3、 顯色的影響
影響顯色的關(guān)鍵是顯色溫度和顯色時(shí)間,，有些實(shí)驗(yàn)室操作人員不嚴(yán)格按說明書操作,，因?yàn)閾?dān)心“花板"，往往是顯色時(shí)間不到就匆忙終止顯色,，結(jié)果造成弱陽性標(biāo)本不能顯色而導(dǎo)致假陰性發(fā)生,。
4、加樣的影響
加入樣品、試劑及混勻時(shí)間的差異稱為操作時(shí)差,。操作時(shí)差在每個(gè)試驗(yàn)中都存在,，尤為手工操作更著，對結(jié)果都會(huì)產(chǎn)生或大或小的影響,。ELISA常用項(xiàng)目,，例如：乙肝兩對半，多是成批檢測,。從加*個(gè)樣本到zui后一個(gè)樣本,，包括中間換吸管尖的工作，在這一過程中有一個(gè)時(shí)間差,；加試劑及混勻也同樣存在時(shí)間差,，這種操作時(shí)間差會(huì)致使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間的不一致，而這種不一致可以直接導(dǎo)致誤差的產(chǎn)生,，尤其是在夏天，若不合理安排時(shí)間,、盡量減少時(shí)差,，將會(huì)導(dǎo)致假陽性或假陰性的結(jié)果出現(xiàn)。
ELISA檢測法影響因素眾多,，上述只是一些常見因素分析,。要想提高ELISA檢測的檢測質(zhì)量，關(guān)鍵還要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室科學(xué)管理,，強(qiáng)化標(biāo)準(zhǔn)化流程操作,，加強(qiáng)質(zhì)量控制，提高人員素質(zhì),，以減少檢測假陽性,、假陰性結(jié)果的發(fā)生。
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