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正確規(guī)范的細(xì)胞凍存的方法
閱讀：1473 發(fā)布時(shí)間：2015-6-16目前,，細(xì)胞凍存zui常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞,。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,，從而引起一系列不良反應(yīng),。
正確細(xì)胞凍存的方法：
1．細(xì)胞：選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次,。
2．計(jì)數(shù)：按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,，計(jì)數(shù)，令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml,，離心去上清,，吸入離心管中。
3．凍存液：先用培養(yǎng)液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO凍存液,，按上法一滴滴加入離心管中,，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。
4．分裝：分裝入無(wú)菌安剖中,，每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液,。
5．封口：用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后,，仔細(xì)檢查，定要封嚴(yán),，必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,，為安全起見(jiàn)，把安剖縫入紗布小袋中,，以防液氮浸入后,，融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩,，末端扎有小牌,，注明：細(xì)胞名稱，凍存日期,，以便日后查找,。