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技術(shù)文章

ELISA試劑標(biāo)本的收集和保存方法

閱讀:1311          發(fā)布時間:2015-6-9

ELISA試劑標(biāo)本的收集和保存方法
一,、尿液標(biāo)本
ELISA試劑同血標(biāo)本一樣,,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動,、藥物量等因素的影響也較大,,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿,。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,,較濃縮和酸化,有形成分(如血細(xì)胞,,上皮細(xì)胞,,管形)相對集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿,,留取方便,,但受飲食,、運(yùn)動、藥物影響較甚,,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等,。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,,此時的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變,。12小時尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),,因時間較長,細(xì)菌易繁殖,,須加入防腐劑甲醛,。24小時尿(*天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,包括蛋白,,糖,,尿17-酮、17-羥類固醇,,兒茶酚胺,Ca2+等,,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),要求無菌,,沖洗外陰后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,,zui少12 ml,,50 ml,定時尿須全部收集,,對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本,。
二,、血液標(biāo)本
有些生理因素,如吸煙,、進(jìn)食、運(yùn)動,、情緒波動、妊娠,、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化,。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素,。
1.外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,,水腫,,破損,。如該部位不符合要求,,以其他手指部位代替,。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血,。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類等)受生理因素影響波動過大,,比較時宜使條件盡量一致,。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),,出血時間或凝血時間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝,、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響,。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測項(xiàng)目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清,。在血清檢測項(xiàng)目中,,ELISA試劑有些(如血糖,,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜,;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項(xiàng)目的檢測必須及時而快速,;有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,,尤其涉及血鉀,,LDH等的測定,。
三,、糞便標(biāo)本
糞便標(biāo)本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液,、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從表面,、深處及糞端多處取材,。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,,保溫送檢,。查日本血吸蟲蟲卵時應(yīng)取粘液,、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,,且需盡快處理,。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),,試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等,。所有糞便標(biāo)本采集后1小時內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,。

四、腦脊液標(biāo)本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,,放置過久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn);有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少,;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒,。因標(biāo)本采集較難,,全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。

五,、胸腹水標(biāo)本
ELISA試劑與腦脊液標(biāo)本一樣,,采集后的標(biāo)本注意安全,及時送檢,。一般也分裝三管,,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,,一管生化檢查,,一管細(xì)菌培養(yǎng),,順序以與腦脊液相同為宜,。

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