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實驗新手咨詢怎樣確定合適血清的稀釋梯度
閱讀:3906 發(fā)布時間:2015-4-20三月份東南大學(xué)張同學(xué)在我司購買了小鼠干擾素系列試劑盒,。他自我介紹是實驗新手,,之前沒有做過ELISA等相關(guān)實驗,。根據(jù)我司試劑盒提供的說明書操作2加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同),、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。咨詢怎樣確定合適血清的稀釋梯度,?
我司根據(jù)張同學(xué)沒有做過相關(guān)實驗經(jīng)驗特此給客戶去提供了詳細的技術(shù)指導(dǎo)并通過我司銷售給以客戶文字答復(fù)。
現(xiàn)在實驗室普遍采用方陣滴定法,。即取不同的抗原抗體梯度做交叉實驗,,比如橫向包被抗原,豎向就用不同濃度抗體,??乖瓭舛确秶梢詮?00ng/孔開始逐步稀釋,抗體的開始稀釋倍數(shù)則要參考生產(chǎn)商的使用說明書. 血清用1%BSA稀釋,,如果血清效價高,,可以稀釋20000倍測定,,一般都會做多個梯度,如稀釋1000,,2000,,4000,8000,,16000倍,。
恒遠預(yù)祝張老師實驗成功!