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小牛血清使用注意事項以及正確的凍存方法
閱讀:4849 發(fā)布時間:2014-9-25使用小牛血清時的注意事項具體如下:
1.供血的新生小牛必須是健康牛的產(chǎn)仔,,并在產(chǎn)后24小時內(nèi)抽血,,此期間不得吸取母乳,。
2.以無菌操作自頸動脈放血,,并在無菌條件下分離血清及濾菌,,全過程在36小時內(nèi)完成。經(jīng)濾菌的血清登一2 0 IC保存,。
3.血清使用前需做細蔭,、支原體培養(yǎng)及內(nèi)毒素測定,在確實無污染的情況下方可使用,。
4.每批小牛血清測定總蛋白含量并分別配成10%,20%,25%于墓礎培養(yǎng)墓和HAT培養(yǎng)墓中,,對骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞進行培養(yǎng),觀察小牛血清對瘤細胞和融合細胞的細胞毒性。若在20%濃度小牛血清情況下,,細胞生長差或死亡,,則該批小牛血清不適宜應用。
怎么凍結(jié)血清才不會使產(chǎn)物質(zhì)量受損:
1.將血清從冷凍箱中取出后,,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,,然后在室溫下使之全溶。但有必要注重的是,,溶解進程中有必要規(guī)矩地搖晃均勻,。
2.血清凍結(jié)后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉積物呈現(xiàn),該怎么處置
3.血清中沉積物的呈現(xiàn)有許多緣由,,但zui遍及的緣由是由于血清中脂蛋白的變性構(gòu)成的,;而血纖維蛋白在血清凍結(jié)后,也會存在于血清中,,亦是構(gòu)成血清沉積物的主要緣由之一。但這些絮狀沉積物,,并不影響血清自身的質(zhì)量,。若您欲去掉這些絮狀沉積物,能夠?qū)⒀宸盅b至無菌離心管中,,以400g略微離心,,上清液即可接著參加培育基內(nèi)一同過濾。不主張您以過濾的辦法去掉這些絮狀沉積物,,由于它可能會堵塞您的過濾膜,。