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恒遠(yuǎn)告訴您“血清”的秘密
閱讀：1310 發(fā)布時(shí)間：2014-6-20在科研實(shí)驗(yàn)室里血清是一個(gè)很常見的東西,，它可以用作動(dòng)物免疫，血清IgG制備,，病理組化封閉,，ELISA實(shí)驗(yàn)樣本等等。一個(gè)很常見的的東西您是否真正了解它,？現(xiàn)恒遠(yuǎn)告訴您有關(guān)它的幾個(gè)秘密：
保存條件：
血清應(yīng)保存在-5℃至-2℃,。然而，若存放于4℃時(shí),，請(qǐng)勿超過一個(gè)月,。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),，再放回冷凍,。
如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損？
將血清從冷凍箱取出后,，先置于2-8C冰箱使之溶解,，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。
避免產(chǎn)生沉淀物
1,、解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃,，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
2,、解凍血清時(shí),，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一,，減少沉淀的發(fā)生
3,、請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,，血清會(huì)變得混濁,，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量,。
4,、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要,，可以無須做此步驟,。
5、若必須做血清的熱滅活,，請(qǐng)遵守56℃,，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻,。溫度過高,，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多,。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),，該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),，以400g稍微離心,，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜,。
何謂熱滅活?
一般是以56℃，30分鐘來處理已解凍的血清,，因?yàn)榇思訜岵襟E,，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,，平滑肌的收縮,，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞的趨化和激活,。
有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用,，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,，像是 "小黑點(diǎn)",，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37C環(huán)境中,，又會(huì)使此沉淀物更增多,，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。