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大鼠TNF-a免疫組化試劑盒操作時的問題由上海恒遠公司歐陽技術來為您解答
閱讀：1677 發(fā)布時間：2014-5-16上海恒遠公司的吳講到：ELISA試劑盒實驗過程中我們會遇到各種各樣的問題，上海恒遠公司吳在這跟老師們說,，實驗過程中遇到問題不要慌,，不要緊張，我們首先要找到問題的出發(fā)點,，是試劑盒的問題還是操作時漏了一個步驟沒做等,，您不知道可以來電詢問我公司的技術人員，下面就讓我司的歐陽技術來為大家講解大鼠TNF-a免疫組化試劑盒在實驗過程中遇到的問題及解析,。
本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法,。用抗大鼠 TNF-a 單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的 TNF-a與單抗結合,，加入生物素化的抗大鼠TNF-a,，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,，加入底物工作液顯藍色,，zui后加終止液硫酸，在450nm處測OD值,，TNF-a濃度與OD值成正比,，可通過繪制標準曲線求出標本中TNF-a濃度。
檢測程序
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul,，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘,。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干,。
3. 每孔中加入*抗體工作液100ul,。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。
4. 洗板：同前,。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul,。將反應板置37℃30分鐘,。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul,，置37 ℃暗處反應15分鐘,。
8. 每孔加入100ul終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值,。
大鼠TNF-a免疫組化試劑盒注意事項
1. 以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,，每次測定應同時做標準曲線。
2. 洗滌過程很關鍵,。洗滌不充分將導致度誤差及OD值錯誤地升高,。
3. 板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥,。
4. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存,。
5. 本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷,！
以上是我公司歐陽技術為各位老師講解的大鼠TNF-a免疫組化試劑盒在實驗過程的遇到的問題及解析,，選擇上海恒遠是您zui忠實的合作伙伴！