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動物檢驗檢疫中定量的核酸檢測技術(shù)

閱讀:1299          發(fā)布時間:2014-3-11

在動物檢驗檢疫中核酸檢測技術(shù)大多數(shù)無需要求定量,,所以在這只作簡單介紹,。核酸檢測的定量化在人醫(yī)臨床和動物疫病基礎(chǔ)研究中應用較多,可用于病情評估,、療效預測和觀察及預后判斷,、疫病的病理分析,,具有一定的應用價值,。核酸的定量檢測一般有以下兩種方法。

    (1)定量的核酸雜交技術(shù)  此類技術(shù)以分支鏈DNA信號放大技術(shù)(branched DNA signal amplification assay,,bDNA)為典型代表,,bDNA技術(shù)系美國Chiron公司的,屬于一種改良的核酸雜交技術(shù),,它定量的基本原理是樣品中被檢的特異性核酸越多,,結(jié)合的探針也就越多,導致信號越強,。此技術(shù)zui關(guān)鍵的部分是信號很強的探針,,因此和其他核酸雜交技術(shù)相比,bDNA技術(shù)的靈敏度很高,。國內(nèi)已有一些醫(yī)院采用bDNA技術(shù)進行HBV基因和HCV基因的定量檢測,。

    (2)定量的PCR技術(shù)  此類技術(shù)有終點稀釋法、熒光PCR,、競爭PCR,、PCR-ELISA等模式。現(xiàn)在zui常用的是前面所述的熒光PCR技術(shù),。它定量的基本原理是樣品中被檢的特異性核酸越多,,熒光信號突破臨界值所需的擴增循環(huán)數(shù)(即Ct值)越小。

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