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恒遠(yuǎn)生物|生化檢驗(yàn)中各種空白的概念
閱讀：635 發(fā)布時(shí)間：2024-4-18對(duì)所謂"試劑空白""樣本空白""水空白""杯空白"等"空白"名詞,下面和大家解釋說明一下：
1、試劑空白：
由于生化測(cè)試測(cè)量的吸光度為相對(duì)吸光度,，所以從理論上來講,，所有終點(diǎn)法的測(cè)試都需要把試劑本身的吸光度扣除（試劑本身的吸光度就是試劑空白）。在傳統(tǒng)手工法中,每次測(cè)定至少做三個(gè)管:測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管,、空白管，其中空白管是試劑加蒸餾水，測(cè)出來也就是試劑空白,。因?yàn)椴僮鳝h(huán)境,、儀器狀態(tài)、試劑穩(wěn)定性等變異,，所以要求每次都要測(cè)定試劑空白,，稱為實(shí)時(shí)試劑空白。
在全自動(dòng)分析儀上,，大都是模擬手工操作,，許多全自動(dòng)分析儀為追求速度，在設(shè)計(jì)上采用折中方法來測(cè)定試劑空白,。以日立全系列生化儀為例,，該系列分析儀做不了實(shí)時(shí)試劑空白，因?yàn)樗鼈內(nèi)窍燃訕颖竞蠹釉噭?，為了折中,，在定?biāo)時(shí)做一個(gè)試劑空白,，保存起來,，需要扣除試劑空白時(shí)再減這個(gè)預(yù)先保存的值。對(duì)于日立的這種試劑空白測(cè)定很多儀器都采用這種方法,，也叫做試劑空白校準(zhǔn),。
在自動(dòng)生化儀上的試劑空白一般表現(xiàn)為零點(diǎn)吸光度，該吸光度是通過校準(zhǔn)確立的,。
2,、樣本空白：
由于溶血、脂血,、黃疸等情況,，會(huì)導(dǎo)致樣本本身的吸光度對(duì)測(cè)試結(jié)果造成影響。所以對(duì)樣本本身吸光度的測(cè)量,，即樣本空白,，可以去除這方面的影響，測(cè)量方法是按照正常測(cè)試的試劑和樣本量,，把試劑換成蒸餾水或生理鹽水來進(jìn)行測(cè)量,。自動(dòng)生化儀上，很難界定樣本空白,。與消除樣本空白有關(guān)的大約有如下幾點(diǎn):
①在雙試劑測(cè)定時(shí),，加入試劑和樣品后的吸光度可一定程度上扣除樣本空白。（故有單試劑不能扣除樣本空白的說法）,。
②現(xiàn)在的試劑抗干擾能力都較強(qiáng),，比如雙試劑，R1加入后先和樣本孵育一段時(shí)間,，將血紅蛋白,、脂肪,、膽紅素等反應(yīng)掉，再加入R2開始測(cè)定反應(yīng),，在一定范圍內(nèi)都可以消除樣本空白,。
③現(xiàn)代全自動(dòng)生化儀大多采用雙波長(zhǎng)測(cè)定，雙波長(zhǎng)測(cè)定的原則是根據(jù)干擾組分和待測(cè)物質(zhì)吸收光譜的峰形特征,，選擇兩個(gè)波長(zhǎng)和,，使干擾組分在這兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸光系數(shù)相等，使待測(cè)物質(zhì)在兩波長(zhǎng)處的吸光系數(shù)有顯著差別,。以兩波長(zhǎng)分別測(cè)定分析溶液的吸光度,， 以兩個(gè)吸光度值之差（△A）計(jì)算。這也可以扣除一部分樣本空白,。
④有些儀器,例如日立系列,有“血清信息"功能的設(shè)置,，做法單獨(dú)占用一個(gè)空白通道來計(jì)算，叫做樣品空白校準(zhǔn),。
3,、水空白：
比色杯在加入水以后的吸光度。水空白的意義主要是對(duì)光路系統(tǒng)進(jìn)行檢查和校正,，如光源,，比色杯等，同時(shí)在計(jì)算中起到消除“杯差"的作用,。日立7060中的Cell Blank（杯空白）測(cè)定的就是水空白,。