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如何驗證ELISA酶標板可靠性?
閱讀:1436 發(fā)布時間:2021-3-10隨著科研事業(yè)的崛起,,越來越多的人選擇ELISA檢測法來做實驗,雖說ELISA實驗的原理及操作簡單,,但是由于實驗的特殊性,,各個方法也都是影響到實驗結果的因素之一。有操作員反應:做了很多次ELISA實驗,,每次都能夠得到線性比較好的標準曲線,,但是同樣濃度的標準品每次的OD值都不一致,猜可能是酶標板的問題,,有什么方法可以快速驗證酶標板的可靠性嗎,?
我公司實驗技術專員解讀【ELISA酶標板可靠性】的驗證原理:
ELISA本身靈敏性很高,每次做出來的值不一樣很正常,,特別是od值比較大的時候更是差別很大,,但是只要不要偏差太大就好,一般偏差要求10%內(nèi)吧,,好的數(shù)據(jù)是3%內(nèi),。
首先要穩(wěn)定所有的條件,不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常,。在同樣條件下同批次的板子,,如果測定不一樣,就是包被問題或者保護劑的問題,,但這兩個都是各個試劑盒的機密,,看看文獻里別人怎么做的。
其次每次實驗的標曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的,,這與抗原抗體反應體系,、作用時間、顯色時間等等一系列的因素有關,。鑒定該ELISA體系是否可靠,,關鍵的指標是加標回收率和稀釋線性,如果你懷疑的話可以做一下,。
一般來說,,國外廠商的ELISA試劑盒是沒有問題的。同時你還要看一下說明書中ELISA試劑盒的靈敏度,,如果樣品濃度低于該檢測下限,,則無法檢測到,這是很正常的現(xiàn)象,,并不是非要每個樣品都要測出值才可以,。