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如何減少ELISA實驗誤差,我有妙招！
閱讀：1257 發(fā)布時間：2021-2-25細節(jié)決定成敗,，在ELISA試劑盒實驗操作中，誤差分有系統(tǒng)誤差,、偶然誤差,、過失誤差，而一個小小的誤差主意能夠影響到實驗,，很多人往往因為一個小細節(jié),，一個誤差沒能讓實驗成功。那么實驗誤差概率如何縮??？今天上海恒遠生物公司教您一些妙招優(yōu)化ELISA，減少誤差：
①：檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗,。能熟練操作實驗儀器,、器械，具有一定總結和分析問題的能力,，對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決,。
②：使用校對過的微量移液器,，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要,。
③：仔細閱讀說明書,，嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用,。值得改進的地方,，反復試驗確定成立后才能改進。
④：洗滌*,，如若洗板不*,，酶結合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽性,。
⑤：嚴控反應時間,，反應時間過長，酶失活,；反應時間過短,，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合，物結構松散不牢固,，容易洗掉,，都可能造成假陰性。
⑥：注意試劑盒保存期,，過保存期的試劑不能使用,。
⑦：評估試劑的實用性，試劑的穩(wěn)定與否,，對準確率的高低到頭重要,。在試劑啟用前，應進行陰,、陽對照及樣品反復比照試驗,，判定試劑符合要求后方可使用。
⑧：嚴格掌握顯色時間,，顯色時間過短,，加入終止液反應終止后，底物結合物的量過少,，易出現(xiàn)假陰性,。超過顯色要求時間后顯色，應判為假陽性,，這可能與試劑本身有關,。加顯色劑后立即顯色,，不可報陽性，這可能是本底顯色的結果,。
⑨：加樣要準確,、快速。如果加樣不準確,，酶物的量不能確定,，直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關,，所以加樣應慎重,。要求在一定時間內加樣完畢的實驗，如果加樣遲緩,，便出現(xiàn)誤差,，而且試劑長時間暴露在外，尤其室溫過高時,，保存期會縮短甚至失效,。
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